Bex2による肝幹細胞の自己複製誘導機構の解明

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本研究では、肝幹細胞の自己複製制御候補分子として得た遺伝子であるBex2の機能解析を目的として実験を行った。具体的には、以下に示す3つのアプローチを用いてBex2の肝幹細胞における機能解析を試みた。1)Bex2により制御される遺伝子をcDNAマイクロアレイ解析により解析し,その遺伝子群の肝幹細胞における機能を調べる。2)Bex2の肝発生における生理的機能を知るため、Bex2ノックアウトマウスを作製する。3)Bex2相互作用因子を生化学的手法を用いて同定し、。同定された分子群との関係からBex2の細胞内における作用機序を明らかにする。これまでに、1)に関してはBex2が制御しうる遺伝子群の中に肝発生において必須であることが知られているような遺伝子群は確認されなかった一方で、肝細胞系譜においては機能が未知である遺伝子群の発現が確認され、現在これらの遺伝子群の機能解析を行っている。2)関してはBex2のORFをEGFP配列で置換することで、ノックアウトES細胞を取得し、Bex2欠損マウスを得た。Bex2欠損マウスは正常に発生し、外見上成体まで正常に生育可能であることが確認されたため、性的条件下においてはdispensableな遺伝子であることが示唆された。次に、EGFPの発現を指標にBex2の転写活性を組織および細胞レベルで観察したところ、Bex2は胎児肝臓においては肝幹細胞において高い発現を示した一方で、分化した成熟肝細胞においては発現が消失した。これらのことから、Bex2の発現は肝幹細胞の未分化性の有用な指標となりうることが考えられた。3)に関しては、研究は進展しなかった。