Sf21 - Aufklärung der Funktion eines pistillen- und pollenspezifischen Gens der Sonnenblume (Helianthus annuus L.)

在一个鉴定Klon Sf 21的雌蕊和花粉特异性的cDNA文库中筛选一个差异基因，在生物学研究中起着重要的作用。高密度BAC-过滤器的克隆杂交技术可以使韦尔登的基因组更加完整，外显子-内含子-结构中的sowohl也可以用于增强功能和增强功能的基因组学研究。Mit Hilfe specifischer Primer可用于韦尔登的RT-PCR分析，以确定是否能在猪实验中分离出cDNA-Klon。我们知道，花粉中也有这样的转录，但不包括花粉、花粉、花粉或花粉。在RT-PCR分析中，我们发现一个转录本和一个基因芯片在艾伦的基因组中都有最好的表达。这些数据显示，21世纪的家庭成员都是普通人，但在家庭中的作用还不够。这些研究结果是对21-Genes中蛋白质的定位和功能研究的一种促进剂分析。Promotordelationsstudien sollen Auskunft über die Struktur es Promotors und die Bedutung einzelner Elemente für die pistillspeziophe Expression liefern.在花粉萌发于韧皮部的过程中，原位杂交可在Griffels的“传递组织”中进行。Ferner wird durch Expression eines GFP-SF21 Fusionsproteins die zelluläre Lokalisierung des SF21 Proteins bestimmt.这种知识是对蛋白质分子功能的研究，基于RNA干扰（RNAi）技术的基础，通过韦尔登技术来解决。

Der über ein differentielles Screening einer cDNA-Bibliothek aus Sonnenblumenblüten identifizierte pistillen- und pollenspezifische Klon Sf21 ist Mitglied einer Genfamilie, die eine Rolle in der Befruchtungsbiologie spielt. Über Koloniehybridisierung gegen High-Density-BAC-Filter konnten mindestens fünf weitere Genkopien gefunden werden, die sowohl in der Exon-Intron-Struktur als auch in den kodierenden Bereichen Unterschiede aufweisen und auf verschiedene Funktionen hinweisen. Mit Hilfe spezifischer Primer konnte über RT-PCR Analysen nachgewiesen werden, dass der ursprünglich isolierte cDNA-Klon der im Pistill exprimierten Genkopie entspricht. Wir konnten zeigen, dass das gleiche Transkript auch in Pollen, nicht aber in Hypokotylen, Keimblättern, Wurzeln oder Blättern, vorkommt. Weitere RT-PCR Analysen haben gezeigt, dass ein zusätzliches Transkript einer anderen Genkopie in allen Geweben - mit Ausnahme von bestäubten Narben - vorhanden ist. Diese Daten belegen, dass die sf21-Genfamilie eine allgemeine, bisher aber noch unbekannte Funktion in Pflanzenzellen hat. Die Ziele dieses Forschungsvorhabens sind zunächst eine Promotoranalyse des im Pistill exprimierten sf21-Gens sowie Lokalisierungs- und Funktionsstudien des entsprechenden Proteins. Promotordeletionsstudien sollen Auskunft über die Struktur es Promotors und die Bedeutung einzelner Elemente für die pistillspezifische Expression liefern. Wie in situ Hybridisierungen zeigten, wird sf21 im "transmitting tissue" des Griffels, in Pollen sowie im Phloem exprimiert. Ferner wird durch Expression eines GFP-SF21 Fusionsproteins die zelluläre Lokalisierung des SF21 Proteins bestimmt. Diese Kenntnis ist Voraussetzung für eine molekulare Funktionsaufklärung des Proteins, die auf Basis der RNA interference (RNAi) Technologie durchgeführt werden soll.