Screening of voltage-sensitive proteins using Voltage-Sensing Phosphatase, VSP

使用电压感应磷酸酶 (VSP) 筛选电压敏感蛋白

• 批准号: 23650210
• 负责人: OKAMURA Yasushi
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23650210/
• 关键词: 生理学; 生体分子; 蛋白質; 電位センサー; イオンチャネル; ホスファターゼ; G蛋白共役型受容体; 神経細胞

We aimed to develop a functional screening system for novel voltage-sensitive membrane protein modules through making a chimeric protein with voltage-sensing phosphatase. First, we identified Ci-VSP as the most suitable among VSP orthologsfor developing the system, since readout of PI(4,5)P2 phosphatase activity was most remarkable. Ci-VSPwas remodeled into a form in which enzyme activity was more remarkablyenhanced by membrane voltage. Other voltage sensors were fused to the cytoplasmic region of Ci-VSP to acquire chimeric voltage sensing phosphatases.

我们的目的是通过与电压敏感磷酸酶的嵌合蛋白制备，开发一种新型电压敏感膜蛋白模块的功能筛选系统。首先，我们确定了Ci-VSP是最适合开发系统的VSP同源物，因为PI(4,5)P2磷酸酶活性的读数最显著。膜电压对ci - vsp酶活性的增强更为显著。其他电压传感器融合到Ci-VSP的细胞质区域，获得嵌合电压感应磷酸酶。

项目成果

Substrate specificity of the voltage-sensing phosphatase (VSP) changes with membrane potential

电压感应磷酸酶 (VSP) 的底物特异性随膜电位的变化而变化

• 发表时间: 2013
• 作者: Kurokawa T;Takasuga S;Sakata S;Yamaguchi S;Shigeo H;Homma K;Sasaki T;Okamura Y
• 通讯作者: Okamura Y

The optimization of the electrophysiological characterization of the voltage-gated proton channel on the artificial membrane.

人工膜上电压门控质子通道电生理特性的优化。

• 发表时间: 2013
• 作者: Kawanabe A;Okamura Y
• 通讯作者: Okamura Y

Subcellular localization of voltage-gated proton channels in primary cultured microglia.

原代培养小胶质细胞中电压门控质子通道的亚细胞定位。

• 发表时间: 2013
• 作者: Kawai T;Imura Y;Koizumi S;Okochi Y;Sakimura K;Okamura Y
• 通讯作者: Okamura Y

Phosphatase activity toward phosphatidylinositol 3,4-bisphosphate [PI(3,4)P2] by voltage-sensing phosphatase (VSP)

电压感应磷酸酶 (VSP) 对磷脂酰肌醇 3,4-二磷酸 [PI(3,4)P2] 的磷酸酶活性

• 发表时间: 2012
• 作者: Kurokawa T;Takasuga S;Sakata S;Yamaguchi S;Horie S;Homma KJ;Sasaki T;Okamura Y
• 通讯作者: Okamura Y

電位依存性ホスファターゼ（VSP）の電位センサーの変異体における電位依存的酵素活性の計測

电压依赖性磷酸酶 (VSP) 电压传感器突变体中电压依赖性酶活性的测量

• 发表时间: 2012
• 作者: 坂田宗平;ホサインモハマド;岡村康司
• 通讯作者: 岡村康司