权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

魚類胚の凍結保存技術開発に関する研究

鱼类胚胎超低温保存技术的研究进展

基本信息

批准号：
11F01092
负责人：
STRUSSMANN C. A. (2013)
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、絶滅の危機にある魚類の保全や貴重な魚種の遺伝子の保存・有効利用を最終目的として、魚類胚の凍結保存技術の確立を目指す。凍結保護物質浸漬条件の開発に加え、生物学的手法やアルギン酸ナトリウムのマイクロカプセル、凍結保護物質のマイクロインジェクション、液体窒素・液化冷媒を用いた急速凍結による凍結保存条件を検討する。本年度(平成25年4月～平成25年9月)では、モデル魚種のシロギス(海産魚)を用いて卵膜の凍結保護剤透過性の向上を目指すため、超音波ソニケーションによる凍結保護物質の浸透促進効果を検討した。その結果、1～3分間で37.5W/cm2の超音波ソニケーション処理を施したシロギス受精卵(体節期胚)内の凍結保護物質濃度が、ソニケーションを行わなかった対象区に比べて、10%DMSO処理区で19.4%、20%DMSO処理区で31.7%、30%DMSO処理区で112.5%まで有意に増加した。さらに、前処理として受精卵を20分間10%DMSOに浸漬した後に20%DMSOで3分間超音波ソニケーションを行ったところ、受精卵は高い生存率を維持しながらも前処理を行わなかった区に比べて約40%のDMSO浸透の増加が確認された。また、尾鰭伸長期の胚を用いた同様の実験では、さらに高い効果が得られた。以上の結果から、超音波ソニケーションにより魚卵の膜透過性が向上し、凍結保護物質の浸透が促進されることが判明した。これらの結果は今後、凍結保存の専門科学雑誌Cryobiologyに投稿する予定である。

This study aims at the conservation of fish and the preservation and utilization of valuable fish embryos in the face of extinction crisis. Development of immersion conditions for freezing protective substances, biological methods, rapid freezing of liquid nitrogen and liquefied freon, and evaluation of freezing preservation conditions This year (April 2015 to September 2015), the penetration promotion effect of freezing protective substances in fish species (marine fish) was discussed by using the upward direction of permeability of freezing protective substances in egg membranes and ultrasonic solutions. The results showed that the concentration of freeze-protecting substance in fertilized eggs (somatic embryos) treated with ultrasonic solution was 37.5W/cm2 between 1 and 3 minutes, and the concentration of freeze-protecting substance in fertilized eggs was 19.4% in 10% DMSO treated area, 31.7% in 20% DMSO treated area, and 112.5% in 30% DMSO treated area. Before treatment, fertilized eggs were immersed in 10% DMSO for 20 minutes. After 20% DMSO immersion, fertilized eggs were immersed in 3 minutes. The high survival rate of fertilized eggs was maintained. After treatment, the DMSO penetration rate was increased by about 40%. In the middle of the middle. The above results show that the permeability of the membrane of fish eggs is improved by ultrasonic wave, and the penetration of freezing protective substances is promoted. The results of this study are expected to be published in the journal Cryobiology.