Periphere zirkadiane Uhren im Zebrafisch: Funktion und Regulation

斑马鱼的外周生物钟：功能和调节

• 批准号: 5408910
• 负责人: Dr. Thomas Dickmeis
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Toxikologie und Genetik (ITG) (aufgelöst)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 无数据
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5408910?language=en
• 关键词: Periphere; zirkadiane; Uhren; im; Zebrafisch

Spezielle Schrittmacherstrukturen wie der suprachiasmatische Nukleus wurden ursprünglich als die alleinigen Sitze der sogenannten zirkadianen Uhr angesehen. Neuere Daten scheinen zu belegen, dass zirkadiane Rhythmen in peripheren Geweben sowohl von multiplen unabhängigen zirkadianen Oszillatoren als auch von externen Zeitgebersignalen gesteuert werden. Mithilfe von Zebrafisch-Herzexplantkulturen und transgenen Zebrafischlarven, die ein Luciferase-Reportergen tragen, wollen wir die Funktion und Regulation von peripheren Oszillatoren in diesem Wirbeltiermodellsystem untersuchen. Durch Analyse des oszillierenden Transkriptoms des Zebrafischherzens sowohl in Kultur als auch in vivo mittels Oligonukleotid-Microarrays wollen wir Effektorgene der endogenen Uhr sowie an der Regulation des peripheren Oszillators beteiligte Gene identifizieren. Der Effekt von Licht auf die zirkadianen Uhren im intakten Tier soll in transgenen Zebrafischlinien untersucht werden, die Luziferase-Reportergene unter der Kontrolle von Promotoren von Genen der zirkadianen Uhr tragen. Diese Fische sollen in Mutantenlinien eingekreuzt werden, die aufgrund struktureller oder funktionaler Augendefekte blind sind, um so den Beitrag photorezeptiver Strukturen zur lichtabhängigen Neueinstellung zirkadianer Rhythmen zu bestimmen. In diesen transgenen Linien soll auch eine mögliche regulatorische Rückkopplungsfunktion von in den Microarray-Experimenten isolierten Genen auf die zirkadianen Oszillatoren getestet werden, indem ihre Translation durch Injektion von Morpholino-Antisense-Oligonukleotiden inhibiert wird. Das Projekt wird viele einzigartige Vorteile des Zebrafischsystems für die Erforschung der Regulation und Funktion zirkadianer Rhythmen in peripheren Geweben eines Wirbeltiers nutzen.

特殊的Schrittmacherstrukturen wurden ursprünglich als the alleinigen Sitze der sogenannten Schkadianen Uhr angesehen。最新的数据显示，在外围区域，多个单一的时钟周期的时钟周期节律也可以由外部的时间信号韦尔登产生。利用荧光素酶报告基因对斑马鱼进行人工养殖和转基因斑马鱼幼虫的研究，将在Wirbeltier模型系统中对斑马鱼围食圈的功能和调控进行探讨。利用寡核苷酸微阵列技术对斑马鱼体内外基因表达进行分析，可用于斑马鱼体内外基因表达调控的研究。在转基因斑马鱼韦尔登中，光对果蝇的影响是通过控制果蝇基因组的启动子来实现的。这种鱼在变线韦尔登中是唯一的，这种鱼的结构或功能都是盲目的，因此，这种鱼的结构可以使新的鱼的节奏更好。在转基因动物实验中，通过注射吗啉代反义寡核苷酸抑制转基因韦尔登的表达，使基因组在微阵列实验中具有更强的调控功能。该项目将提供多种不同的斑马系统，用于研究周围环境中的调节和功能，使其具有更高的节奏。