新規実験系を用いた卵成熟過程でのサイクリンB1 mRNA 翻訳制御機構の解明

使用新的实验系统阐明卵母细胞成熟过程中细胞周期蛋白 B1 mRNA 翻译控制机制

• 批准号: 11J06666
• 负责人: 安田 恭大
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J06666/
• 关键词: cyclin B1; translational regulation; RNA localization; oocyte maturation; zebrafish; mRNA localization; Pumilio; real-time imaging

時期・部位特異的なタンパク質発現は、細胞機能の獲得を含む様々な生命現象の正常な運行に重要である。ゼブラフィッシュの卵母細胞においても、母性mRNAであるサイクリンB1 mRNAが動物局側細胞質、卵門の直下に局在し、凝集体を形成している。局在したサイクリンB1 mRNAは未成熟卵中で翻訳抑制を受けており、卵成熟誘起ホルモン(MIH)の刺激により開始される"卵成熟"(卵母細胞の受精能獲得プロセス)の過程において、時期特異的に翻訳活性化を受ける。サイクリンB1 mRNAは、卵成熟のトリガーとなる分子であるM期促進因子の調節サブユニットをコードしており、サイクリンB1のタンパク質が無ければ、卵成熟は進行しない。そのため、サイクリンB1 mRNAが適切な時期に翻訳される事は正常な受精能をもった卵を形成するために不可欠である。前回までの報告で、このサイクリンB1 mRNAの凝集体形成と時期特異的翻訳制御に重要な役割をもつ9塩基の配列を同定したと報告した。今年度は、この配列がどのようにきのうするのかについて、実験を進めた。その結果、この配列は特定のタンパク質と相互作用して働く事を明らかにした。現在はその分子実体を探っているところである。また、サイクリンB1 mRNAの凝集体はアクチン繊維に依存して存在している事が示唆されており、実際にアクチンの脱重合を阻害すると、MIHの刺激下でもサイクリンB1 mRNAの凝集体が維持され、翻訳活性化も起こらない。しかしながら、上記9塩基に変異を持ち、凝集体形成しないレポーターmRNAは、MIHと阻害剤の両方で処理した場合翻訳が活性化されてしまう事を証明した。これらの事実は、ORFを介した凝集体形成が翻訳抑制機構の一部である事を強く示唆するものである。

The special conditions of the time-related parts are very important, and the cellular machinery can make the life seem as important as the normal operation. The oocytes were divided into four groups: the oocyte, the maternal mRNA, the B1 mRNA, the oocyte, the oocytes, the oocytes and the oocytes. In the immature eggs of the oocyte cycle B1 mRNA, the inhibition of the activation of the oocytes during the process of reversion and time-dependent activation of the oocytes at the beginning of fertilization (fertilization of the oocytes) and the activation of the cycle (MIH). The egg maturation cycle was not affected by B1 mRNA, the molecular promoters of egg maturation and maturation, and the egg maturation was not detected. During the normal period of time, fertilization can prevent the formation of eggs and make sure that the eggs are not in arrears. In the previous review of the report, the B1 mRNA condensate formed a special turnover control system for the most important service cutters. 9-year base was assigned to the same set of regular reports. This year, we will arrange for you to improve your performance in the current year. The result of the experiment, the specific information on the interaction between each other and the specific information on the interaction are listed. Now we are going to explore the molecular body. There are signs of instillation of mRNA, loss of coincidence, inhibition of blockage, stimulation of MIH, maintenance of B1 mRNA agglutination, and activation. In the last 9 years, the structure of the condensate was formed, the mRNA was formed, and the MIH was used to prevent the formation of the condensate. In the event of an accident, the coagulant collective of the ORF was introduced to form an overturning inhibition mechanism.

项目成果

卵成熟過程でのゼブラフィッシュ サイクリンB1 mRNA翻訳制御に関する新規シス配列の同定

鉴定与卵母细胞成熟过程中斑马鱼细胞周期蛋白 B1 mRNA 翻译调节相关的新型顺式序列

• 发表时间: 2013
• 作者: Daichi Hirano;Kazuya Yoshida;Mitsushige Oda;Hiroki Nakanishi;安田恭大
• 通讯作者: 安田恭大

Transgenic zebrafish reveals a novel cis-acting element responsible for the spatio-temporally regulated translational activation of cyclin B1 mRNA in oocytes

转基因斑马鱼揭示了一种新的顺式作用元件，负责卵母细胞中细胞周期蛋白 B1 mRNA 时空调节的翻译激活

• 发表时间: 2012
• 作者: Ota;R.;Kotani;T.;Masakane;Y.;Lars Hesselholt;Kyota Yasuda
• 通讯作者: Kyota Yasuda