微小管構造制御因子の機能解析とそれを標的とした薬剤探索

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「Gas7bの細胞骨格構造制御機能の解析」①Gas7bの機能(tubulin結合、actin結合、MTs束化、MTs/F-actin架橋)に重要なF-BAR domainタンパク質を作成し、MTsの束化能を持つことを電子顕微鏡で確認した。②論文を投稿し、Gas7b、tubulin、actinタンパク質のゲルろ過と分子量別定量について、再現性を指摘された。そのため、新たにタンパク質を準備し、全く同じ実験実施、同様の結果が出ることを確認した。「Gas7bの生体機能解析」①野生型成体マウスの各臓器(脳、心臓、肺、肝臓、膵臓、脾臓、腎臓、精巣、前立腺、卵巣)を採取した。ライセートを用いたWestern blottingにより、Gas7タンパク質の発現量を解析した。その結果、脳だけでなく生殖器(精巣、前立腺、卵巣)でGas7bおよびGas7aのタンパク質が検出された。中でも精巣における発現量は顕著に多かった。生殖器におけるGas7の役割は未知であるが、生殖器組織への分化や、減数分裂との関わり等が今後の着目点である。また、少量ではあるが、心臓と肺でもanti-Gas7抗体でバンドが検出された。しかしながら、バンドの位置は既知バンドとわずかに泳動度が異なっていた。この検出されたバンドが、新たなGas7アイソフォームであるか、類似性のある異なるタンパク質であるか、今後詳細を確認する必要がある。②週齢別(新生児(1週齢)、子(4週齢)、生体(50週齢))マウスの脳をそれぞれ採取し、同様にWestern blottingによりGas7タンパク質の発現量を解析した。その結果、新生児脳よりも子・成体マウスでのタンパク質量が多くなることが明らかとなった。さらに加齢したマウスでの経時的変化から、加齢疾患との関わりを明らかにすることができる。