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小分子応答性を有する機能性リポソームの創製

创建对小分子敏感的功能性脂质体

基本信息

批准号：
11J08726
负责人：
外岡大志
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J08726/
关键词：
脂質二重膜マイクロチャンバ MEMS リポソーム

项目摘要

当初は分子応答性を有する機能性リポソームの作製を目的としていたが、前年度までに作製した脂質二重膜チャンバを改良することにより、膜タンパク質の輸送機能解析の分野における重要な技術に発展させることができると考えられたため最終目的を変更し研究を進めた。本年度は、膜電位固定下で膜タンパク質の輸送機能を蛍光計測することを目的とし、脂質膜チャンバの内部に電極を有するシステムを構築した。人工脂質膜を用いた膜タンパク質の輸送機能の計測には主に2つの手法が用いられてきた。一方は脂質膜の電荷の移動が小さい輸送両側に電極を設置し、脂質膜中の膜タンパク質を介して輸送される電荷の移動を電流として検出する電気計測、他方は脂質膜で囲まれた微小な空間(脂質膜チャンバ)に予め基質特異性の蛍光指示薬を封入し、膜タンパク質を介して輸送される基質によるチャンバ内の蛍光強度の上昇を検出する蛍光計測である。それぞれに長所短所が存在するが、蛍光計測は電荷の移動が小さい輸送を検出可能である点で優れている。しかし、従来の蛍光計測手法は、電極が設置されていないため膜電位を固定した状態で膜タンパク質の輸送機能を計測することは不可能であった。このため、輸送機能の膜電位依存性は計測することは困難だった。膜電位は細胞膜を介した電位差であり、多くの膜タンパク質の輸送機能の変化を引き起こすことが知られている。そこで膜電位固定下で膜タンパク質の輸送機能を蛍光計測することを目的とし、微細加工技術を用いて、内部に電極を有する微小な脂質膜チャンバを構築した。この脂質膜チャンバを用いて、実際に膜電位を固定した状態でαヘモリシンを介したカルシウムイオンの輸送の蛍光計測を行った。

At the beginning, there was a mechanism for molecular response. The purpose of the system was to improve the performance of the double membrane in the previous year. In the previous year, the double membrane was used to improve the performance of the system. The membrane transport machine can analyze the most important technology development in the world. This year, under the fixed position of the film, the film transmission machine can be used to calculate the performance of the system, and there is an active electricity source in the membrane system. The artificial fat membrane is used to use the membrane to make sure that the transmission machine can be used to calculate the operation of the artificial fat membrane. One side of the fat film electric charge transfer device, one side of the lipid film charge transfer device, the other side of the lipid film charge transfer device, the other side of the lipid film device, the other side of the lipid film, the small space (the lipid film device), the device, the device. The film is based on the optical intensity of the optical meter. As long as there is a shortage of electricity, it is possible to send a small amount of electricity to the customer as soon as possible. The system, the optical meter, the active setting, the fixed position, the fixed status, the transmission, the transmitter, the device, the transmitter, the transmitter. On the other hand, the transmission machine can improve the location dependence of the film. The membrane potential difference is affected by the membrane potential difference, and the multi-carrier membrane transmission machine can be used to induce the transmission of electrical energy. When the membrane position is fixed, the film transmission machine can be used for optical measurement, micro-processing technology, and there is a small amount of electricity in the film. The grease film is used to fix the status of the film. It is necessary to send the photoscale meter to the consumer.