Methylation analysis of multiploid colorectal cancer for the epigenetic therapy establishment

多倍体结直肠癌甲基化分析用于表观遗传学治疗的建立

• 批准号: 23790412
• 负责人: KONISHI Yasuhiro
• 金额: $ 1.33万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23790412/
• 关键词: DNA ploidy; DNAメチル化; フローサイトメトリー; 大腸癌; エピゲノム

DNA multiploid cancer is defined as the coexistence of diploid and aneuploid tumor cell populations in the same area, and is a useful model for cancer progression analysis. In this study, we used multiploid colorectal cancer and attempted to clarify p53 and Ki-ras mutations, and the correlation between cancer-related gene methylation and diploid to aneuploid progression. Using the crypt isolation technique and flow cytometric cell sorting, we detected 33 multiploid colorectal cancers, and divided multiploid populations into diploid and aneuploid populations without stromal tissue. In each population, we extracted and amplified DNA by polymerase chain reaction assay, and then analyzed Ki-ras and p53 mutations and cancer-related gene methylation status. p53 mutation analysis was performed by single-strand conformation polymorphism and direct sequencing. Ki -ras mutatio n analysis was performed by direct sequencing. Methylation analysis of cancer-related gene promoter regions was performed by combined bisulfite restriction assay . Mutations of p53 gene in aneuploid populations (63.2%) were more frequent than in diopoid populations (1 0.5%). Methylation of ZFP64 , HPP1 and RASSF2A in aneuploid populations (7.9 ％、13.2％、36.8％) was higher than in diploid populations. The results suggest that mutation of p53 and methylation of ZFP64 , HPP1and RASSF2A are important for diploid to aneuploid progression.

DNA多倍体癌症被定义为二倍体和非整倍体肿瘤细胞群在同一区域中共存，是癌症进展分析的有用模型。在本研究中，我们使用多倍体结直肠癌，试图阐明 p53 和 Ki-ras 突变，以及癌症相关基因甲基化与二倍体向非整倍体进展之间的相关性。使用隐窝分离技术和流式细胞术细胞分选，我们检测了 33 种多倍体结直肠癌，并将多倍体群体分为二倍体和不含基质组织的非整倍体群体。在每个人群中，我们通过聚合酶链式反应测定提取并扩增 DNA，然后分析 Ki-ras 和 p53 突变以及癌症相关基因甲基化状态。通过单链构象多态性和直接测序进行p53突变分析。 Ki-ras突变分析通过直接测序进行。通过联合亚硫酸氢盐限制性分析对癌症相关基因启动子区域进行甲基化分析。 p53 基因突变在非整倍体群体中 (63.2%) 比二阿片群体中 (1·0.5%) 更频繁。非整倍体群体中ZFP64、HPP1和RASSF2A的甲基化程度(7.9％、13.2％、36.8％)高于二倍体群体。结果表明，p53 的突变以及 ZFP64、HPP1 和 RASSF2A 的甲基化对于二倍体向非整倍体的进展很重要。

项目成果

大腸腺腫におけるメチル化解析．

结直肠腺瘤的甲基化分析。

• 发表时间: 2012
• 作者: Yamamoto Y;Misumi T;Eguchi S;Chochi Y;Kitahara S;Nakao M;Nagao K;Hara T;Sakano S;Furuya T;Oga A;Kawauchi S;Sasaki K;Matsuyama H;無江良晴
• 通讯作者: 無江良晴

胃腺腫と腫瘍グレードに基づいた分化型粘膜内胃癌の臨床病理学的および分子病理学的解析．

基于胃腺瘤和肿瘤分级的分化型粘膜内胃癌的临床病理学和分子病理学分析

• 发表时间: 2012
• 期刊: 胃と腸
• 作者: Hirata Y;Sakata N;et al;菅井 有
• 通讯作者: 菅井 有

胃腺腫と腫瘍グレードに基づいた分化型粘膜内癌の臨床病理学的および分子病理学的解析

基于肿瘤分级的胃腺瘤和分化型粘膜内癌的临床病理和分子病理分析

• 发表时间: 2012
• 期刊: 胃と腸
• 作者: 菅井有;幅野渉;上杉憲幸;小西康弘
• 通讯作者: 小西康弘

大腸癌における癌腺管と背景粘膜の非腫瘍性腺管のDNAメチル化解析．

结直肠癌癌导管和背景粘膜非肿瘤导管的 DNA 甲基化分析。

• 发表时间: 2012
• 作者: Nakao M;Kawauchi S;Uchiyama T;Acachi J;Ito H;Chochi Y;Furuya T;Oga A;Sasaki K;吉田雅一
• 通讯作者: 吉田雅一

大腸癌の病理学的評価はどの切片標本で行うべきか

结直肠癌的病理学评估应使用哪种切片标本？

• 发表时间: 2011
• 作者: Woo T;Okudela K;Mitsui H;Yazawa T;Ogawa N;Tajiri M;Yamamoto T;Rino Y;Kitamura H;Masuda M;一戸昌明;吉田広美,川崎朋範ら;Yamashita A;小西康弘
• 通讯作者: 小西康弘