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魚類の卵黄蛋白・脂質蓄積に関与するリポ蛋白質受容体アダプター蛋白に関する研究

脂蛋白受体衔接蛋白参与鱼类蛋黄蛋白和脂质积累的研究

基本信息

批准号：
12J01961
负责人：
水田紘子
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J01961/
关键词：
ビテロジェニン受容体 ARH 卵黄形成魚類繁殖生理エンドサイトーシス

项目摘要

卵生脊椎動物において、ビテロジェニン(Vtg)は、その受容体(Vtgr)を介したエンドサイトーシスにより卵母細胞内に取り込まれ卵黄を形成する。一般に、リポ蛋白質受容体(LR)はリガンドと結合すると、LRアダプター蛋白質やクラスリンと呼ばれるエンドサイトーシス関連因子と複合体を形成し、エンドサイトーシスを開始する。最近、アフリカツメガエルにおいて、LRアダプター蛋白質の一つである常染色体劣性高コレステロール血症原因蛋白質(Arh)が、Vtgrを介したVtgのエンドサイトーシスに関与することが示唆された。本研究では、魚類の卵黄形成を開始あるいは制御する因子の候補としてArhに着目し、その生化学的性状を明らかにすることを目的とした。卵巣抽出液を試料として抗Arh抗体(a-Arh)を用いたWestern blot法に供した結果、還元処理下において、Arhの推定分子量と近い約36 kDaの蛋白質バンドを検出した。この抗体を用いて免疫組織化学的手法に供し、Arhの卵巣における局在を調べた結果、Arhは卵黄形成に関与しない可能性が示唆された。そこで、他に卵黄形成に関与するArhのサブタイプが存在する可能性を考え、再度Arh遺伝子のクローニングを行った。その結果、新たに一種類のArh様遺伝子が得られた。そこで、先に得たものをArh I、後に得たものをArh IIとし、これらの発現解析を行った。その結果、Arh IIはVtgrと良く似た発現パターンを示し、このことから、卵母細胞におけるVtgrを介したVtgのエンドサイトーシスに特にArh IIが関与する可能性が示された。以上、本実験では本種卵巣に発現する二種Arhの発現動態を魚類で初めて明らかにした。研究の成果は、魚類卵巣におけるVtgrを介したVtgのエンドサイトーシス機構に関して新たな基礎的知見を提供した。

Egg-laying vertebrates において, ビテロジェニン (vacations) は, その by let body (Vtgr) を interface したエンドサイトーシスにより oocytes in に take り込まれ yolk を form する. General に, リポ protein let body (LR) はリガンドと combining すると, LR アダプター protein やクラスリンと shout ばれるエンドサイトーシス masato even factor と complex をし, エンドサイトーシスを began する. Recently, アフリカツメガエルにおいて, LR アダプター protein の a つである autosomal recessive high コレステロール hematic disease causes protein (Arh) が, Vtgr を interface した vacations のエンドサイトーシスに masato and することが in stopping された. This study では, fish の vitellogenesis を began あるいは suppression する factor の alternate として Arh に mesh し, そのを Ming of the characteristics of biochemistry らかにすることを purpose とした. Egg 巣 extract を sample として Arh antibody resistance (a - Arh) をいた Western blot method for しにた result, also yuan 処において, Arh の presumption of molecular weight と nearly い about 36 kDa protein のバンドを検 out した. をこの antibody with いて immunohistochemical technique for しに, Arh の eggs 巣における bureau in を adjustable べた results, Arh は vitellogenesis に masato and しながい possibility in stopping された. そこで, he に vitellogenesis に masato and する Arh のサブタイプが exist する possibility をえ test, Arh again but 伝のクローニングを line った. Youdaoplaceholder0 そ result, a new たに is derived from the 伝 of a similar <s:1> Arh seed が to られた. そこで, first にたものを Arh に when I, たものを Arh II とし, これらの発 now line analytical をった. その results, Arh II は Vtgr と good く like た発 now パターンをし, このことから, oocyte における Vtgr を interface した vacations のエンドサイトーシスに, に Arh II が masato and すがる possibility in された. Above, this be 験では this kind of egg 巣に発 now する two Arh の発 now early dynamic を fish でめて Ming らかにした. Research achievements of のは, fish eggs 巣における Vtgr を interface した vacations のエンドサイトーシス institutions に masato して new たな basic knowledge を provide した.