病原メカニズムの解明に基づく海産白点虫症対策の確立

阐明海洋白斑病致病机制，制定防治措施

• 批准号: 12J06422
• 负责人: 善家 孝介
• 金额: $ 2.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J06422/
• 关键词: 海産白点虫; ワクチン; 病原因子; テトラヒメナ; タンパク質分解酵素; リン酸化酵素; 寄生虫

今年度の研究の目標は、同定した病原因子候補について、組み換えタンパク質を作製し、ワクチンとしての効果を評価することであった。具体的なワクチン候補として、酸性リン酸化酵素（ＰＴＰ１ｂ）とタンパク質分解酵素（cathepsinL-like）を用いた。・テトラヒメナ発現系を用いたワクチン生産の予備実験；テトラヒメナ発現系を利用して生産した組み換えタンパク質の抗原性を確認するために、海産白点虫の既知の抗原であるi-antigenの組み換えタンパク質を生産し、実験魚（ブラックモリー）に摂取しワクチンとしての効果を確認した。攻撃試験後の生残率、ＥＬＩＳＡによるi-antigen特異抗体の抗体価、いずれにおいても対照区に比べ、ワクチンを接種した魚において上昇が見られたことから、テトラヒメナ発現系で作製した組み換えタンパク質が抗原性を有することが分かった。・テトラヒメナ発現系を用いた病原因子候補の生産：前年度に、i-antigenの生産に関する最適化は行っていたが、同様の方法では上記の病原因子候補を効率的に生産することができなかった。そこで、さらなる最適化を検討した結果、コドンの最適化が有効であることが判明した。同じ、繊毛虫類であることから、コドンの最適化は不要であると予測していたが、特定のコドンについては、テトラヒメナのコドン使用に最適化することが必須であることが判明した。・養殖対象魚を用いたワクチン試験：海産白点虫の被害が甚大である、マダイについて、上記のi-antigen、PTP1b、cathepsinL-likeを抗原としたワクチン試験を行うことを計画していたが、上述した理由により、組み換えタンパク質の生産が遅れたため、期間内に試験を行うことはできなかった。これに関しては、受け入れ教員の協力の下、引き続き実行中である。

This year, the target of the study, the etiology of the pathogen, and the etiology of the pathogen were studied in this year. The specific acid enzyme (PTP1b), acid enzyme (cathepsinL-like), acid enzyme, acid enzyme and acid enzyme. In the system, the antigenicity was confirmed by the antigenicity of the equipment. The antigenicity of the antigenicity was confirmed by the antigenicity of the antigenicity of the antigenicity. The antigenicity was confirmed by the antigenicity of the antigenicity of the antigenicity, the antigenicity of the antigen, the antigen, the The morbidity and disability rate after the test, ELISA specific antibody test, anti-i-antigen specific antibody test, anti-i-antigen specific antibody test, anti-HBV specific antibody test, anti-HBV specific antibody antibody test, anti-DNA specific antibody antibody test, anti-virus specific antibody antibody test, anti-DNA specific antibody antibody test The etiology of the disease is based on the etiology of the pathogen: in the previous year, in the previous year, in i-antigen, and in the same way as in the previous year, and in the same way as in the previous year. The results of the test results and the results of the results show that the results of the results and the results of the results show that the results of the results and the results of the results show that the results are not correct. In the same way, caterpillars do not use the information system, do not use the information system, and use the information system to determine the accuracy of the system. For example, the colonized animals are very large, infected, i-antigen, PTP1b, cathepsinL-like, antigens, antigens, antigens and antigens. Please make sure that you are under the coordination of the receiving instructor, and refer to the students in the training line.