造血幹細胞機能に関わるＡＴＭおよびＴＥＲＴの多能性獲得に果たす機能の解析

ATM和TERT参与造血干细胞获得多能性的功能分析

• 批准号: 12J07121
• 负责人: 木下 泰輔
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J07121/
• 关键词: テロメラーゼ; TERT; ATM; 多能性幹細胞; 体細胞リプログラミング; Telomerase

体細胞にリプログラミングファクターを導入することで多能性幹細胞が誘導されることが示されているが、そのメカニズムについては未だよくわかっていないところが多い。本研究では、造血幹細胞で重要な働きを担いさらにそれぞれがDNA損傷応答とテロメア伸長に決定的な働きを持つ因子であるATMおよびTERTに着目し、多能性幹細胞の誘導および維持における両遺伝子の機能を解析することを目的とする。TERT遺伝子を欠損した体細胞からは多能性幹細胞の樹立効率が著しく低下した一方、レスキュー実験においてTERTはその酵素活性の有無に依らず誘導効率の改善に寄与することを明らかにした。TERT欠損細胞にウイルスベクターで正常なTERTまたは酵素活性を欠失したTERTを導入した細胞を用いてマイクロアレイ解析を行い、TERTの酵素活性に依らないターゲット遺伝子を抽出した。発現が低下する遺伝子の中にはEzh2やSuv39h2、HDAC9などのヘテロクロマチンに関する遺伝子が見出され、TERTはクロマチン再構成因子としてクロマチン構造に作用することでリプログラミングにおける遺伝子発現変化を促進している可能性が示唆された。リプログラミングファクターを導入した後の細胞においても同様に解析し、発現上昇する遺伝子の中にEsrrbやKlf17といったリプログラミングでの機能が既に報告されている遺伝子が含まれることを見出した。樹立されたTERT欠損iPS細胞では連続した継代において一時的な増殖障害およびテラトーマ形成不全を示した。各継代数の野生型ならびにTERT欠損iPS細胞についてマイクロアレイ解析を行った。GO解析により、「細胞接着」と「形態形成」に分類される遺伝子群が異常の現れる継代数40のTERT欠損iPS細胞で発現低下していることが明らかとなった。

Somatic stem cells can be induced into pluripotent stem cells, but not into pluripotent stem cells. The purpose of this study is to analyze the function of hematopoietic stem cells, which are important factors for DNA damage response and elongation. The efficiency of pluripotent stem cell establishment is lower than that of somatic cells, and the efficiency of TERT induction is improved depending on the presence or absence of TERT enzyme activity TERT enzyme activity is absent in cells that are damaged, and TERT enzyme activity is absent in cells that are damaged, and TERT enzyme activity is absent. The possibility of promoting the development of low molecular weight proteins is shown in Ezh2, Suv39h2, HDAC9 and TERT. In the case of a cell that is not in the cell, the cell that is in the cell that is in the cell The formation of defective iPS cells is not complete. Each generation of wild-type and tert-deficient iPS cells is analyzed. GO analysis, cell adhesion, morphogenesis, classification, genetic subgroup, abnormal appearance, generation 40, defective iPS cells, low appearance, bright appearance, abnormal appearance, abnormal

项目成果

Telomerase reverse transcriptase (TERT) has an extratelomeric function in somatic cell reprogramming

端粒酶逆转录酶（TERT）在体细胞重编程中具有端粒外功能

• 发表时间: 2013
• 作者: Keiichi Imato;Atsushi Takahara;Hideyuki Otsuka;坂喜 美佳;木下 泰輔
• 通讯作者: 木下 泰輔