気孔の光合成依存的二酸化炭素応答メカニズムの解析

气孔光合作用依赖性二氧化碳响应机制分析

• 批准号: 12J08951
• 负责人: 藤田 貴志
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J08951/
• 关键词: 気孔; 二酸化炭素; 環境応答; 光合成; 生理学; アポプラスト

1. ツユクサ表皮のプロトンポンプのWestern blotting気孔開口を促進する葉肉シグナルは孔辺細胞膜プロトンポンプをリン酸化して活性化する可能性がある．ツユクサ表皮が葉肉組織と接触している場合に，孔辺細胞膜プロトンポンプがリン酸化されるかを解析するため，プロトンポンプのリン酸化レベルの解析を行うことにした．ツユクサの剥離表皮を集め，プロトンポンプのWestern blottingを試した．名古屋大学の木下研究室では，孔辺細胞プロトプラストを用いたプロトンポンプのWestern blottingが盛んに行われている（e.g. Hayashi et al., PCP, 2010）この手法を参考にして，ツユクサのプロトンポンプのWestern blottingを行うことにした．ツユクサには，丁寧に表皮を剥離すると，剥離表皮に葉肉組織が混入しないという利点がある．したがって，ツユクサの場合には，剥離表皮でWestern blottingを行うことで，孔辺細胞膜プロトンポンプのリン酸化レベルを解析できると期待される．Western blottingを行うことで，ツユクサの細胞膜プロトンポンプを検出できるようになった．2. 葉肉アポプラストシグナルの分子サイズの推定ツユクサの剥離表皮と葉肉組織の間に，透析膜を挟み，気孔の応答を観察した．透過可能な分子の分子量の上限が，100～500の範囲にある透析膜を挟んだ場合には，気孔開口は抑制されなかった．一方，気孔閉鎖は抑制され，閉鎖速度が遅くなった．したがって，気孔開口を促進する葉肉シグナルの分子量は100よりも小さく，気孔閉鎖を促進する葉肉シグナルの分子量の範囲は100～500であると推定された．この研究結果から，葉肉シグナルの同定を行う上で，葉肉シグナルの候補物質を大幅に絞り込こめるようになると期待される．

1。促进气孔开口的叶状体信号表皮中质子泵的蛋白质印迹可以磷酸化并激活防护细胞膜质子泵。为了分析当正弦曲线的表皮与叶肉组织接触时，警卫细胞膜质子泵是否被磷酸化，我们决定分析质子泵的磷酸化水平。我们收集了糖浆的剥落表皮，并测试了质子泵的蛋白质印迹。在名古屋大学的Kinoshita实验室，使用后卫细胞原生质体对质子泵的蛋白质印迹进行了积极进行（例如Hayashi等人，PCP，2010年）。使用这种技术，我们决定在Symurpa中执行质子泵的蛋白质印迹。这样做的优点是，如果仔细去除表皮，则叶肉组织不会污染到脱落的表皮中。因此，在糖浆的情况下，预计分离的表皮上的蛋白质印迹将能够分析防护细胞膜质子泵的磷酸化水平。通过执行蛋白质印迹，现在可以检测到糖浆的细胞膜质子泵。 2。估计叶酸膜膜的分子大小透析膜夹在叶叶氏的分离表皮和叶肉组织之间，并观察到气孔的反应。当具有渗透分子的分子量上限的透析膜在100至500范围内时，气孔开口不会被抑制。同时，气孔闭合被抑制，闭合速度放慢了速度。因此，促进气孔开口的叶叶叶信号的分子量小于100，并且估计促进气孔闭合的叶叶叶信号的分子量范围在100至500之间。根据这项研究的结果，预计叶叶叶信号的候选物质将在识别叶片时会显着缩小。

项目成果

気孔開度を調整する葉肉アポプラストシグナルの分子サイズの推定

估计调节气孔孔径的叶肉质外体信号的分子大小

• 发表时间: 2014
• 作者: Yuna Yahagi;Tomohiro Koyano;Masanori Kunieda;Xiaodong Yang;佐藤(増本)直子;増本直子;増本直子;増本直子;藤田貴志
• 通讯作者: 藤田貴志

葉肉アポプラスト液が気孔のC0_2応答におよぼす影響

叶肉质外体液对气孔C0_2响应的影响

• 发表时间: 2012
• 作者: Yuna Yahagi;Tomohiro Koyano;Masanori Kunieda;Xiaodong Yang;佐藤(増本)直子;増本直子;増本直子;増本直子;藤田貴志;藤田 貴志;藤田貴志;藤田貴志;藤田貴志
• 通讯作者: 藤田貴志

Effects of mesophyll apoplastic solution on stomatal responses to C0_2

叶肉质外体溶液对气孔对C0_2反应的影响

• 发表时间: 2012
• 作者: Yuna Yahagi;Tomohiro Koyano;Masanori Kunieda;Xiaodong Yang;佐藤(増本)直子;増本直子;増本直子;増本直子;藤田貴志;藤田 貴志;藤田貴志;藤田貴志;藤田貴志;藤田貴志
• 通讯作者: 藤田貴志

The analysis of the mesophyll roles that controlthe stomatal responses in C3 and CAM plants

控制 C3 和 CAM 植物气孔反应的叶肉作用分析

• 发表时间: 2013
• 作者: Yuna Yahagi;Tomohiro Koyano;Masanori Kunieda;Xiaodong Yang;佐藤(増本)直子;増本直子;増本直子;増本直子;藤田貴志;藤田 貴志
• 通讯作者: 藤田 貴志

CE-MSを用いた気孔開閉時の表皮アポプラスト液組成の解析

使用 CE-MS 分析气孔打开和关闭过程中表皮质外体液体成分

• 发表时间: 2013
• 作者: Yuna Yahagi;Tomohiro Koyano;Masanori Kunieda;Xiaodong Yang;佐藤(増本)直子;増本直子;増本直子;増本直子;藤田貴志;藤田 貴志;藤田貴志
• 通讯作者: 藤田貴志