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ショウジョウバエをモデルとした生殖細胞形成機構の解析

以果蝇为模型分析生殖细胞形成机制

基本信息

批准号：
12J40192
负责人：
羽生ー中村賀津子 (2014-2015)
金额：
$ 2.44万
依托单位：
Kumamoto University (2014-2015)The Institute of Physical and Chemical Research (2012-2013)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J40192/
关键词：
生殖細胞生殖質転写抑制始原生殖細胞 microRNA ショウジョウバエ

项目摘要

ショウジョウバエ始原生殖細胞（極細胞）の発生プログラムは、卵形成過程で合成され、卵内の特定の領域（生殖質）に蓄積し、極細胞に取り込まれる母性因子の働きによって制御される。これまでに、極細胞の形成に関わる母性因子が多数単離されているが、その多くは、卵形成過程において生殖質の形成に関わる因子である。一方、胚発生過程において極細胞の形成・分化を直接制御する因子は、少数しか同定されていない。本研究では、新規生殖質因子の同定と、その分子機能解析を通して、生殖細胞発生プログラムの理解を進めることを目指す。まず、生殖質因子の一つで、極細胞形成に中心的役割を担うPgcの機能解析を進めた。前年度までに、Pgcが、極細胞でのmicroRNA（miRNA）の発現を抑制し、生殖質を構成する母性mRNAをmiRNA依存的な分解から保護していることを見いだしていた。従って、Pgcの機能の一つが、母性mRNAの分解を防ぎ、機能的な生殖質を維持することであると結論した。本年度は、以上の結果と考察をもとに、論文を作成、投稿した。また、新規生殖質因子の同定を目的とした遺伝学スクリーニングを行った。極細胞の形成・分化に関わる未同定因子の中には、卵形成過程初期で必須の機能を持つものがあると予想できる。このような因子の突然変異体は、卵形成不全を起こすため、従来の解析を免れてきたと考えられる。そこで、卵形成初期過程を正常に進行させた後に、卵形成中期以降でRNAサイレンシングを誘導する遺伝子ノックダウンスクリーニング系を構築した。本年度は、ストックセンターで維持されている短ヘアピンRNA発現系統、約1500 系統を解析した。そして、遺伝子ノックダウンにより、極細胞の形成や分化に異常を示す系統を複数単離した。今後は、スクリーニングを続けるとともに、新規因子の候補について、個別に解析を進める計画である。

The primordial reproductive cells (positive cells) are involved in the process of oogenesis, the synthesis of oocytes, the accumulation of specific fields (reproductive cells) in the eggs, and the control of maternal factors in the ovum. Most of the maternal factors are isolated and polygenic, and the process of oogenesis is related to the formation of reproductive factors. On the other hand, the process of embryo birth plays an important role in the formation and differentiation of cells, which directly controls the factors of pregnancy, and a few of them are the same as those in the same group. In this study, the reproductive factors were the same as those of the newly standardized reproductive factors, the molecular mechanism could be used to analyze the genetic factors, and the reproductive cells could understand the target of the reproductive cycle. It is possible to analyze the performance of the Pgc machine which is responsible for the growth of reproductive factors and the center of cell formation. In the previous year, Pgc, cell cycle microRNA (miRNA) showed inhibition and reproductive function became maternal mRNA miRNA dependent breakdown. The prevention of maternal mRNA breakdown, and the maintenance of reproductive function of maternal mRNA, and the results of this study are as follows. The results of this year's and the above results have reviewed the preparation, writing and submission of articles. The new regulation of reproductive factors is the same as that of the same purpose. The formation and differentiation of cells is not the same as that of the factors in the early stage of oogenesis, and it is necessary to maintain the ability to do so. All of a sudden, the egg formation is not complete, and the egg formation is not complete. In the early stage of oogenesis, the normal post-mortem period and the middle stage of oogenesis in order to lower the level of RNA in the early stage of oogenesis. This year, we will continue to improve the performance of the current RNA system, which is about 1500 system analysis. The number of copies of the system is isolated from each other, and the formation of differentiation cells indicates that the complex number of the system is isolated. In the future, we will make sure that the new regulations are expected, and that we will analyze the progress of the project.