Ultrastructural analyses of intramembranous particles of flowing erythrocytes and their membrane skeletal structures by in vivo cryotechnique

体内冷冻技术对流动红细胞膜内颗粒及其膜骨架结构的超微结构分析

• 批准号: 23659093
• 负责人: OHNO Shinichi
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659093/
• 关键词: 生体内凍結技法; 流動赤血球機能的形態像; 膜骨格関連蛋白; 膜内粒子; エッチングレプリカ法; 走査電顕法; 蛍光量子ドット; 組織内微小環境; 膜関連蛋白

We frozen living animal organs in vivo to analyze tissues and cells without ischemia and anoxia for deep-etching method and scanning electron microscopy (SEM). Mouse kidney organs were frozen, and replica membranes of flowing erythrocytes were prepared, showing their extension along long axis, and intramembranous particles were linearly arranged. By SEM, they took ellipsoidal shapes in aorta, but were discoid-shaped in inferior vena cava. In liver sinusoids, they presented variously shaped images, being changed into discoid-shapes due to cardiac arrest. They were immunostained in alveolar capillaries for membrane skeletal proteins, showing irregular shapes. They were often adhered to blood vessel endothelium, showing dynamic images which efficiently performed gas exchange. We also performed the cardiac arrest to check hemodynamics of lungs and small intestines with quantum dot injection, and microenvironments of living animal organs were involved in morphofunctions of erythrocytes.

冰冻活体动物器官，对无缺血缺氧的组织和细胞进行深刻法和扫描电子显微镜分析。冰冻小鼠肾脏，制备流动的红细胞膜，膜内颗粒呈线状排列，沿长轴延伸。扫描电镜下，主动脉呈椭圆形，下腔静脉呈盘状。在肝窦，它们呈现各种形状的图像，由于心脏骤停而变成盘状。在肺泡毛细血管内可见膜骨架蛋白免疫染色，呈不规则形状。它们通常附着在血管内皮细胞上，呈现动态图像，有效地进行气体交换。我们还进行了心脏骤停，用量子点注射检查肺和小肠的血流动力学，活体动物器官的微环境参与了红细胞的形态功能。

项目成果

動物生体内臓器の凍結技法-光イメージング解析の機能形態学的意義[基礎医学的研究から臨床診断応用への挑戦]

动物体内器官冷冻技术——光学成像分析的功能和形态意义[从基础医学研究到临床诊断应用的挑战]

• 发表时间: 2013
• 作者: 大野 伸一;寺田 信生;齊藤 百合花;大野 伸彦;齊藤 成;藤井 靖久
• 通讯作者: 藤井 靖久

動的細胞組織の光イメージングと機能形態像の融合

动态细胞组织光学成像与功能形态学成像的融合

• 发表时间: 2013
• 作者: 大野 伸一;寺田 信生;齊藤 百合花;大野 伸彦
• 通讯作者: 大野 伸彦

凍結で広がる形態学の新世界：基礎医学的研究から臨床応用へ挑戦

冷冻打开形态学新世界：从基础医学研究到临床应用

• 发表时间: 2012
• 作者: Kimura;Y.;Mikami;Y.;Osumi;K.;Tsugane;M.;Oka;J-I.;Kimura;H.;大野伸一
• 通讯作者: 大野伸一

生体内凍結技法による悪性黒色腫初期転移肺における血小板凝集と肺血行動態の定量的解析法

使用体内冷冻技术定量分析恶性黑色素瘤早期转移性肺中的血小板聚集和肺血流动力学

• 发表时间: 2014
• 作者: 齊藤 百合花;寺田 信生;大野 伸彦;大野 伸一
• 通讯作者: 大野 伸一

動物生体内臓器の機能分子形態像を探る:光イメージング法と凍結技法の融合

探索体内动物器官的功能分子形态：光学成像与冷冻技术的融合

• 发表时间: 2013
• 作者: Kimura;H;Mikami;Y.;Shibuya;N.;Ogasawara;Y.;大野伸一 ら
• 通讯作者: 大野伸一 ら