Biologische Aktivität von Proteinen an Polyacrylsäure-Bürsten
聚丙烯酸刷上蛋白质的生物活性
基本信息
- 批准号:5424814
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:2004
- 资助国家:德国
- 起止时间:2003-12-31 至 2010-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Proteine absorbieren an den meisten Grenzflächen spontan. Kürzlich wurde herausgefunden, dass Oberflächen, die mit einer Polyacrylsäure-Bürste bedeckt sind, bei niedriger Ionenstärke große Mengen Protein binden. Erhöht man die Ionenstärke allerdings auf nur etwa 100 mM, beobachtet man Proteindesorption bzw. Proteinresistenz der Oberfläche unabhängig von der Ladung der Proteinmoleküle. Die Ionenstärke der Proteinlösung wirkt somit als physikalisch-chemischer "Schalter" für die Proteinaffinität der Polyacrylsäure-Bürste. Dieser Effekt ist neu und einzigartig, denn er beruht offenbar nicht auf einer Abschirmung elektrostatischer Wechselwirkungen oder einer Veränderung der Protein-Nettoladung. In dem beantragten Projekt sollen daher planare Polyacrylsäure-Bürsten als neuartige Grenzflächenbeschichtung für die kontrollierte und variable Proteinabsorption umfassend charakterisiert werden. Es sollen u.a. der Adsorptionsgrad in Abhängigkeit verschiedener Parameter, die Proteinverteilung innerhalb der Bürste sowie die globale und innere Dynamik der absorbierten Proteinmoleküle ermittelt werden. Als Untersuchungsmethoden kommen hauptsächlich die Neutronen-Reflektometrie und die total internal reflection fluorescence (TIRF)-Spektroskopie zum Einsatz, letztere auch zeitaufgelöst. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen sind für eine Reihe von biotechnologischen Anwendungen interessant, bei denen die Proteinaffinität einer Grenzfläche in situ variiert werden muss.
蛋白质的吸收使其更容易自发的吸收。Kürzlich wurde herausgefunden,dass Oberflächen,die mit einer Polyacrylsäure-Bürste bedeckt sind,bei niedriger Ionenstärke große Mengen Protein binden.当离子交换剂的浓度仅为100 mM时,可观察到蛋白质的解吸作用。Proteinresistenz der Oberfläche unabhängig von der Ladung der Proteinmoleküle. Die Ionenstärke der Proteinlösungkt somit als physikalisch-chemischer“Schalter”für die Proteinaffinität der Polyacrylsäure-Bürste.这种效应是新的,也是一种新的,因为它不是通过一种吸收静电波的方法或一种蛋白质网络的方法来进攻的。在该工程中,聚丙烯酰胺-聚氯乙烯的平面尺寸为中性,用于控制和可变的蛋白质吸收,具有韦尔登特性。这是我们的责任在Abhängigkeit versedener参数中的吸附梯度,Bürste sowie die globale and innere Dynamik der Adsorptionsgrad der Adsorptionsgrad der Adsorptionsgrad der Adsorptionsgrad der Abhängigkeit versedener Parameter,die Proteinverteilung innerhalb der Bürste sowie die globale and innere Dynamik der Adsorptionsgrad der Proteinmoleküle ermittelt韦尔登.所有的测量方法都是中子反射测量和全内反射荧光(TIRF)测量的主要方法,因此也是非常重要的。结果显示,在蛋白亲和性发生变化的情况下,原位凝胶韦尔登必须发生变化。
项目成果
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