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運動による骨格筋幹細胞機能の活性化に関わる分子基盤の解明

阐明运动激活骨骼肌干细胞功能的分子基础

基本信息

批准号：
15J00411
负责人：
藤巻慎
金额：
$ 1.39万
依托单位：
Nagasaki University (2016)University of Tsukuba (2015)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J00411/
关键词：
サテライト細胞除負荷 Notchシグナル Pax7 Myf5 MyoD Wntシグナル

项目摘要

本年度は、マウスの後肢懸垂モデルを用い、除負荷によるサテライト細胞の機能変化を、サテライト細胞の運命決定を制御するNotchシグナルに着目して検討した。C57BL6/jマウスを尾部から吊るし、後肢を接地できないようにして１週間飼育した。その結果、マウスの下肢筋重量が有意に減少し、後肢懸垂によって筋萎縮が誘導されたことを確認した。後肢懸垂（HS）群と通常飼育（Cont）群のマウスの長趾伸筋から単一筋筋線維を単離し、サテライト細胞のマーカー遺伝子であるPax7の抗体を用いて免疫染色することで筋線維あたりのサテライト細胞数を定量した。その結果、HS群はCont群と比較して、サテライト細胞数が減少していることが明らかとなった。続いて、HS群とCont群の双方の後肢筋を全て摘出し、フローサイトメーターによってサテライト細胞を分取した。その後、RNAを抽出し、定量PCRによってNotchシグナル関連遺伝子の発現量を定量したところ、HS群から採取したサテライト細胞はCont群と比較して低値を示した。これらのことから、除負荷によるサテライト細胞の減少はNotchシグナルの不活性化に起因する可能性が示唆された。さらに両群から単離した単一筋線維を培養し、Pax7とサテライト細胞活性化のマーカーであるMyoDの抗体を用いて免疫染色することでサテライト細胞の活性化および増殖能力を評価したところ、除負荷を経験したサテライト細胞は活性化が遅延し、増殖能力が低下することが示唆された。以上の結果から、除負荷によってサテライト細胞の性質が変化し、活性化や増殖といった機能が低下することが明らかとなった。本研究成果は、これまでのサテライト細胞研究では明らかになっていない新規の知見であり、本研究は分野の発展に寄与する有意義な研究である。

This year's functional improvement of the hind limb suspension system and load-removing function of the cellsを、サテライトThe fate of the cell is determined by the control of the cell. Notch is controlled by the cell. C57BL6/jマウスをThe tail is lifted and the hind limbs are grounded and raised in one week. As a result, the muscle weight of the lower limbs was intentionally reduced, and the hind limb hanging was induced and muscle atrophy was confirmed. Hind limb suspension (HS) group and normal breeding (Cont) group のマウスのlong toe extension muscle から単一 tendon line dimension を単里し、サテライトcell のThe immunostaining of the antibody against Pax7 was performed using the いて immunostaining method and the quantification of the number of cells was carried out.その results, HS group は Cont group と comparison して, サテライトが cell number がしていることが明らかとなった.続いて, HS group and Cont group, both sides of the hind limb tendons are completely extracted, and the フローサイトメーターによってサテライトcells are divided and extracted.その后、RNA を Extraction し、Quantitative PCR によってNotch シグナルrelated legacy 伝子の発existing をdetermination Amount of measurement, HS group measurement and measurement of cells and comparison of HS group measurement and comparison of measurement results.これらのことから、Load removal によるサテライトCell reduction はNotch シグナルのinactivation にCause するPossibility がDisplay 唆された.さらに両群から単立した単一丝线dimensionalをcultureし、Pax7とサテライトcells Activated MyoD antibody and immunostaining using MyoD antibody Activation and proliferation of ライト cells The activation of sterile cells has been delayed, and the proliferation ability has been reduced. The results of the above are the results, and the properties of the cells have been modified by removing the load. , activation of reproduction and reduction of function and reduction of function. The results of this research are as follows: The new rule is known as the new knowledge, the research is divided into the new research and the meaningful research.