遺伝子改変技術を用いたフタトゲチマダニオートファジー関連分子の機能解析

利用基因修饰技术分析硬蜱自噬相关分子的功能

• 批准号: 15J03477
• 负责人: 川野 優
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J03477/
• 关键词: マダニ; オートファジー; 遺伝子改変技術; RNA干渉法; 卵母細胞; 卵形成; TALEN

本研究は、マダニにおける遺伝子ノックアウト・ノックインの遺伝子改変技術を確立し、また、オートファジー関連分子 HlATG6/HlAtg6 のより詳細な機能解析を行い、マダニ繁殖生理における分子基盤の一端を解明することを目的としている。また、本研究の成果を、マダニ及びマダニ媒介感染症の新規防除法確立の足掛かりとすることを大きな目標とする。これまでの研究により、RNA 干渉法 (RNAi) を用いて HlATG6 遺伝子のノックダウンを行った結果、HlATG6 遺伝子はフタトゲチマダニの卵形成過程において重要な役割を担うことが判明している(Kawano et al., 2013)。前年度に行ったフタトゲチマダニ卵母細胞の発育過程についての形態学的解析により、当該年度において、実験結果を正しく評価するために必要とされる卵母細胞の発育ステージ分類法はすでに確立されている。当該年度は、前年度の報告書に記載した研究計画に基づき、フタトゲチマダニにおける遺伝子ノックイン・ノックアウトを行うための TALEN システムの構築を試みた。しかし、フタトゲチマダニにおけるTALEN を用いた遺伝子ノックインおよびノックアウトの成功には至らず、TALEN を利用した遺伝子改変システムを確立するには至らなかった。TALEN を用いた遺伝子ノックイン・ノックアウトをフタトゲチマダニへ適応させ、システム系を確立させることが、本研究の鍵となる重要な部分であった。本研究の根幹となる目標を達成できず、以降の研究計画も頓挫する運びとなった。本年度の研究において、目に見える大きな成果は得られず、論文として形にできる実績も残せていない。

In this study, we aimed to establish the molecular modification technology of HlATG6/HlAtg6, analyze the detailed function of HlATG6/HlAtg6, and elucidate one end of the molecular matrix of reproductive physiology. The results of this study are as follows: The results of RNA interference (RNAi), which was used in this study, showed that HlATG 6 gene was important in the process of egg formation (Kawano et al., 2013)。The classification of oocyte development is established when the morphological analysis of oocyte development in the previous year is performed and the results are evaluated. When the report of the previous year records the basic research plan, it will be tested for the construction of the TALEN system. TALEN is used to modify the system successfully. TALEN is a key part of this study. The purpose of this study is to achieve the goals of the study, and to reduce the impact of the study plan. This year's research results are expected to be published in the future.

项目成果

フタトゲチマダニ単為生殖系における卵巣および卵母細胞の発育

硬蜱孤雌生殖系统中卵巢和卵母细胞的发育

• 发表时间: 2015
• 作者: Tanimul Alam;Hiroki Maruyama;Chun Li;Strahil Pastuhov;Paola Nix Michael Bastiani;Naoki Hisamoto;Kunihiro Matsumoto;三原 涼・白藤（梅宮） 梨可・阿部 靖之・川野 優（帯畜大・原虫研）・松尾 智英（鹿児島大・寄生虫）・藤崎 幸蔵（農研機構）・鈴木 宏志（帯畜大・原虫研）
• 通讯作者: 三原 涼・白藤（梅宮） 梨可・阿部 靖之・川野 優（帯畜大・原虫研）・松尾 智英（鹿児島大・寄生虫）・藤崎 幸蔵（農研機構）・鈴木 宏志（帯畜大・原虫研）