Ｓｔｏｃｈａｓｔｉｃアプローチによる歯根膜幹細胞の同定

使用随机方法鉴定牙周膜干细胞

• 批准号: 15J03981
• 负责人: 岩山 智明
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J03981/
• 关键词: 歯根膜; 間葉系幹細胞; 系譜解析; ノックインマウス; 周皮細胞; Nestin

本研究は、歯根膜組織における間葉系幹細胞もしくは前駆細胞集団の局在や機能を同定し、同細胞群がどのようなプロセスで様々な間葉系細胞へと分化するのかを明らかにすることで、歯周組織の恒常性維持と再生機構の理解を深めることを目的としている。本年度は主に以下の3つの成果を得た。1.Dermo1-Cre；R26-Tomatoマウスの歯周組織の組織学的解析により、歯根膜組織中の間葉系細胞のほぼすべてがTomato陽性であったことから、「H2BGFP標識保持細胞」の同定に用いるCreマウスをDermo1-Creとした。Dermo1-Cre; R26-tTA;TetO-H2BGFPマウスを交配により作製し、6週齢からドキシサイクリンを投与し、経時的に解析したところ、6ヶ月経過するとほとんどの細胞でGFP標識が消失していることが明らかとなった。2.歯根膜細胞の初代培養プロトコルを確立し、Nestin-GFPマウス由来の歯根膜細胞の単離およびセルソーターによるGFP陽性細胞の分取・培養、さらにはシングル・セルソーティング法によるNestin-GFP陽性クローンを樹立した。同細胞は高い分化能を持つ間葉系幹細胞である可能性が示唆されており、今後の歯根膜細胞を解析するための有用なリソースとなることが期待される。3.Nestin-Cre; Nestin-GFP; R26-Tomatoマウスの第二臼歯に5-0絹糸を結紮することにより、歯槽骨吸収を惹起する骨吸収モデル実験を行った。絹糸除去後の歯周組織修復過程におけるNestin陽性細胞の系譜を経時的に解析したところ、平常時は毛細血管近傍にのみ位置するペリサイトであったNestin陽性細胞が、修復時には組織全体に広がって、修復組織の大部分を占めることが明らかとなった。以上の得られた結果を取りまとめ、国内の学会で発表を行った。

The purpose of this study is to clarify the identity and function of mesenchymal stem cells in dental root membrane tissue and the differentiation of mesenchymal cells in the same cell group, so as to deepen the understanding of the maintenance of the permanence of dental tissue and the regenerative mechanism. This year, the following three major achievements have been achieved. 1. Histological analysis of Dermo1-Cre;R26-Tomato tissue, mesenchymal cells in dental root membrane tissue, and identification of "H2BGFP marker holding cells". Dermo1-Cre; R26-tTA;TetO-H2BGFP marker for mating control, 6 weeks old, 6 months old, 6 months old 2. Primary culture of dental root membrane cells: establishment of Nestin-GFP positive cells, isolation of Nestin-GFP positive cells from dental root membrane cells, isolation of Nestin-GFP positive cells from dental root membrane cells, and establishment of Nestin-GFP positive cells from dental root membrane cells. The possibility of high differentiation of mesenchymal stem cells in the same cells indicates that future analysis of mesenchymal stem cells is useful. 3.Nestin-Cre; Nestin-GFP; R26-Tomato: 5-0 Teeth of the Second Tooth Nestin positive cells were analyzed in the repair process of peripheral tissue after silk removal. Nestin positive cells were located near capillaries at ordinary times. Nestin positive cells were analyzed in the repair process of peripheral tissue. Most of the repair tissue was occupied. The above results were obtained and the domestic society was established.

项目成果

Col-GFPマウス歯周組織の組織学的解析

Col-GFP 小鼠牙周组织的组织学分析

• 发表时间: 2017
• 作者: 上田 亜美;岩山 智明;村上 伸也
• 通讯作者: 村上 伸也

PDGFRαシグナルによるpericytesの運命決定機構の解明

PDGFRα信号阐明周细胞的命运决定机制

• 发表时间: 2016
• 作者: 岩山智明;脇坂 聡;村上伸也
• 通讯作者: 村上伸也

Nestin+ cells are pericytes in periodontal ligament

巢蛋白细胞是牙周膜中的周细胞

• 发表时间: 2015
• 作者: Tomoaki Iwayama;Satoshi Wakisaka and Shinya Murakami
• 通讯作者: Satoshi Wakisaka and Shinya Murakami

Cell-autonomous contribution of nestin-positive cells to periodontal tissue repair

巢蛋白阳性细胞对牙周组织修复的细胞自主贡献

• 发表时间: 2017
• 作者: T Iwayama;T Ueda;K Tomita;A Hirai;M Takedachi;S Wakisaka;S Murakami
• 通讯作者: S Murakami

Detrimental effects of duplicate reads and low complexity regions on RNA- and ChIP-seq data.

• DOI: 10.1186/1471-2105-16-s13-s10
• 发表时间: 2015
• 期刊: BMC bioinformatics
• 影响因子: 3
• 作者: Dozmorov MG;Adrianto I;Giles CB;Glass E;Glenn SB;Montgomery C;Sivils KL;Olson LE;Iwayama T;Freeman WM;Lessard CJ;Wren JD
• 通讯作者: Wren JD