ヘパトゾーンに対する免疫応答に関与する抗原蛋白の同定とワクチンへの応用

肝区免疫反应中涉及的抗原蛋白的鉴定及其在疫苗中的应用

• 批准号: 15J05949
• 负责人: 立野 守洋
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kagoshima University (2016)Yamaguchi University (2015)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J05949/
• 关键词: ヘパトゾーン

本年度の研究計画としては、ヘパトゾーンのSPF猫への実験感染および各発育ステージのヘパトゾーンの収集および抗原蛋白となり得る候補蛋白の探索と同定を行う予定であった。ヘパトゾーンはそのオーシストを含むマダニを動物が経口的に摂取することで感染が成立することが知られている。そこで、まずはヘパトゾーン陽性のマダニの採取および採取されたマダニ体内でヘパトゾーンの発育サイクルが宿主に感染可能なオーシストまで進んでいるかの確認を行った。本年度は日本産ヤマネコに寄生しているマダニを計32匹採取した。過去の報告を参照し、マダニ採取後の保存条件の検討を行い、保存中のマダニの生存率を向上させることを試みた。しかしながら、採取したマダニのそのほとんどが保存中に死亡し、ヘパトゾーンのSPF猫への実験感染を行うことはできなかった。また、死亡したマダニの押捺標本ではオーシストは確認されなかった。一方で、ヘパトゾーンと同じアピコンプレクサ原虫に属する原虫においてワクチンの候補蛋白としての有用性が示唆されているプロフィリンに着目し、ヘパトゾーンでも同様の蛋白の発現があるかの検討を行った。まず、ヘパトゾーン由来のプロフィリン遺伝子の増幅および遺伝子配列の決定を試みた。ヘパトゾーン陽性のヤマネコの血液からRNAを抽出し、それらをサンプルとしてRT-PCRを行った。ヘパトゾーンのゲノム遺伝子の全塩基配列はいずれの種においても不明であるため、他の原虫のプロフィリン遺伝子の配列を参考にプライマーを作成した。しかし、他の原虫で報告のあるプライマーを用いたPCRではヘパトゾーン由来のプロフィリン遺伝子は増幅されず、その後も複数種類のプライマーを作成したが、いずれにおいても遺伝子の増幅は確認されず、ヘパトゾーンにおけるプロフィリン蛋白の発現を検討するに至らなかった。

In this year's research program, SPF cats have been infected with this year's research program, and their families have been infected. Please tell me that there is an infection in the mouth of an animal that contains an animal. There is a risk that the host may be infected with infection in the body. The total number of parasitic birds in Japan this year is 32. After the previous reports are referenced and selected, the saving conditions will be changed, and the survival rate will be improved. Please tell me that you are dying in the process of saving, that is, the SPF cat is not infected. Don't worry, don't die, don't worry, don't worry. In the same way, the protozoa belong to the genus protozoa. Protozoa, protozoa, protozoa The reason for this is that you need to know that you are going to make a decision. I don't know. I don't know. I don't know. I don't know what to say. I don't know. I don't know. The parasite report and other parasite reports show that you can use the PCR message to make sure that you are aware of the data, the number of copies, the number of files, the number of copies, the size of the data, the number of copies, the number of