細胞小器官間リン脂質輸送機構の解明

Saccharomyces cerevisiaeのSec14ファミリータンパク質の一つをコードするSFH1は、ミトコンドリアでのホスファチジルエタノールアミン (PE)合成に関わるPSD1の破壊株の非発酵性炭素源培地におけるエタノールアミン要求性のマルチコピーサプレッサーとして取得された。SFH1の高発現によりPSD1破壊株のPE量がエンドソーム、ゴルジ体、液胞でPE合成に関わるPsd2依存的に回復することが確認されたが、Sfh1の機能は不明であった。本年度は、Sfh1はPEやホスファチジルセリン (PS)の合成酵素の発現量や活性を変化させないが、PSの蛍光アナログであるNBD-PSを人工膜間で輸送する能力を有すること、Sfh1は酵母細胞内でPSを含む様々なリン脂質と結合していることを明らかにした。これまでに本研究で行ったSfh1の局在解析の結果と合わせ、Sfh1はPsd2が局在するエンドソーム、ゴルジ体、液胞に基質となるPSを輸送することでPE合成を亢進する可能性が示唆された。また、SFH1の破壊によりPSD1破壊株のリン脂質組成が変化すること、非発酵性炭素源培地における生育が悪化することを示し、内在性のSfh1がリン脂質の合成・代謝に関与している可能性が示唆された。SEC14は必須遺伝子であるのに対して、SEC14の5つのホモログSFH1-5は破壊しても生育にほとんど影響が見られず、それらの機能には未解明な点が多い。SEC14の温度感受性変異株は同時にオキシステロール結合タンパク質ホモログ遺伝子OSH4を破壊することにより制限温度での生育が回復することから、この株においてさらにSFH1-5を全て破壊した株を作製し、生育を解析した。その結果、この株は制限温度下、富栄養培地で増殖が見られなかったことから、Sfh1-5がSec14と重複する機能持つことが示唆された。

Saccharomyces cerevisiaeのSec14ファミリータンパク質の一つをコードするSFH1は、ミトコンドリアでのホスファチジルエタノールアミン (PE)合成に関わるPSD1の破壊株の非発酵性炭素源培地におけるエタノールアミン要求性のマルチコピーサプレッサーとして取得された。SFH1の高発現によりPSD1破壊株のPE量がエンドソーム、ゴルジ体、液胞でPE合成に関わるPsd2依存的に回復することが確認されたが、Sfh1の機能は不明であった。本年度は、Sfh1はPEやホスファチジルセリン (PS)の合成酵素の発現量や活性を変化させないが、PSの蛍光アナログであるNBD-PSを人工膜間で輸送する能力を有すること、Sfh1は酵母細胞内でPSを含む様々なリン脂質と結合していることを明らかにした。これまでに本研究で行ったSfh1の局在解析の結果と合わせ、Sfh1はPsd2が局在するエンドソーム、ゴルジ体、液胞に基質となるPSを輸送することでPE合成を亢進する可能性が示唆された。また、SFH1の破壊によりPSD1破壊株のリン脂質組成が変化すること、非発酵性炭素源培地における生育が悪化することを示し、内在性のSfh1がリン脂質の合成・代謝に関与している可能性が示唆された。SEC14は必須遺伝子であるのに対して、SEC14の5つのホモログSFH1-5は破壊しても生育にほとんど影響が見られず、それらの機能には未解明な点が多い。SEC14の温度感受性変異株は同時にオキシステロール結合タンパク質ホモログ遺伝子OSH4を破壊することにより制限温度での生育が回復することから、この株においてさらにSFH1-5を全て破壊した株を作製し、生育を解析した。その結果、この株は制限温度下、富栄養培地で増殖が見られなかったことから、Sfh1-5がSec14と重複する機能持つことが示唆された。