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呼吸鎖電子伝達系を構成する酵素複合体シトクロムｂｄの構造および機能解析

构成呼吸链电子传递系统的酶复合物细胞色素bd的结构和功能分析

基本信息

批准号：
15J40158
负责人：
仲庭哲津子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題は呼吸鎖複合体であるシトクロム bd の結晶構造を明らかにし、酸素の少ない低酸素 (微好気) 条件下で特異的に作用するメカニズムの解明を目指すものである。申請者は精力的にシトクロム bd複合体結晶の分解能の向上に努めていた。その矢先、シトクロム bd の結晶構造決定が欧州のグループよりなされ、栗栖教授との話合いの結果、今後のキャリア形成に向け前向きな方針修正を行った。初年度途中より、緑藻が持つ新規なアンテナタンパク質（SCP）の結晶構造解析を中心的に進めることとなった。SCP は膜タンパク質であり、シトクロム bd 複合体と同様に結晶の高分解能化を課題としている。そこで、申請者はシトクロム bd 複合体で培った手法をフルに適応し、SCP 結晶の分解能の向上を目指した。その結果、本申請期間内にX線回折測定において回折像の最高到達点が 20 オングストローム分解能から 4.8 オングストローム分解能の高分解能化に導いた。本最終年度では、2 年めに引き続き SCP の再結晶化法による高分解能化と SCP の高純度化を目的とした再構成法の確立を行った。さらに平行して、本申請課題で進めていたシトクロム bd 複合体の 5.2 オングストローム分解能のフルデータの収集にも成功し、構造精密化後に既存の構造と比較した。モデル分子は、すでに結晶構造が報告されたシトクロム bd 分子を用い、分子置換法により初期位相の決定を行った。得られた初期位相を用いて、精密化および構造構築を進め、既知のシトクロム bd との構造比較を行ったところ、新たな構造知見を見出すことは出来なかった。

This study is aimed at understanding the crystal structure of respiratory lock complex and its specific effect under the condition of low acidity and low acidity. The applicant is interested in the decomposition of bd complex crystals. The crystal structure of the crystal structure In the beginning of the year, the green algae kept the new rules. The crystal structure analysis of SCP was carried out in the center. SCP is the subject of high decomposition energy for the crystallization of complex and homogeneous materials. For example, the applicant may refer to the decomposition of SCP crystals as well as the method of culturing bd complexes. As a result, during the period of this application, the highest arrival point of X-ray reflection image was 20 ° C, and the decomposition energy was 4.8 ° C. This year, the recrystallization method of SCP was established for the purpose of high decomposition energy and high purity of SCP. In parallel, the subject of the present application is to further develop the 5.2-degree decomposition energy of the bd complex, and to compare the existing structures after the refinement of the structure. The molecular structure is reported to be the initial phase of the molecule, and the molecular replacement method is used to determine the initial phase. The initial phase of the structure is used, the structure is refined, the structure is compared, and the new structure is discovered.