マウス内ｉＰＳ細胞由来心筋の成熟過程と筋芽細胞との融合過程の非侵襲イメージング

小鼠iPS细胞来源心肌成熟过程及与成肌细胞融合过程的无创成像

• 批准号: 15J40172
• 负责人: 喜多 清
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J40172/
• 关键词: in vivo イメージング; 非侵襲; 心筋; iPS細胞; マウス; in vivoイメージング; ヒトiPS細胞; 心筋組織

本研究の最終目的は、ヒトiPS細胞由来心筋組織をマウス耳介内に移植し、移植した心筋組織が自発的に誘引する血管新生や血流を伴う様子を高精度(>15nm)にかつリアルタイムで非侵襲in vivoイメージングするものである。本目的を達成するために、１年目に「マウス耳介生体チャンバーを利用し血流を伴うヒトiPS由来心筋組織の作製技術の開発」を課題とし順調に遂行することができた。2年目は、iPS細胞を用いた再生医療技術を磨くべく米国への研究留学を行い、iPS細胞の先端研究についての知見を深め、本研究にも応用できる経験を積んだ。帰国後（3年目以降）は非侵襲in vivoイメージング技術を向上させ、これまでに例のない高時間分解能（11ms/frame）での非侵襲in vivoイメージングに成功した（論文投稿中）。さらに非侵襲in vivoイメージングのための新規トランスジェニックマウス(Tgマウス)の作製に力を注ぎ、血管内皮にGFPを発現するTgマウス（STOCK Tg(TIE2GFP)287Sato/J）に、免疫不全能を持たせる「Tg-免疫不全マウス」の作出を行った。GFPが発現するTgマウス胚にCRISPR/Cas9で遺伝子組み換え操作を施し22匹の挙仔を得た。続いてジェノタイプを判定し、「Tg-免疫不全マウス」であることを確認した。なお、本研究を遂行するために他の研究所との共同研究契約を交わした。その際、事務方での書類のやり取りに延べ４か月以上を要したため、研究遂行が大幅に遅れた。作出した「Tg-免疫不全マウス」を用い、繁殖させ系統を維持し、非侵襲in vivoイメージングを行いたいところではあるが、研究遅延により実施することができなかった。しかし、非侵襲in vivoイメージングのためのノックアウトTgマウスを作出できたことの意義は大きく、現在、論文を投稿する準備を行っている。

This research aim の は, ヒ ト iPS cell origin heart muscle tissue を マ ウ ス ear interface し に transplantation, transplantation し た heart muscle tissue が from 発 に decoys す る angiogenesis や を blood flow with う others child を high precision (> 15 nm) に か つ リ ア ル タ イ ム で noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ す る も の で あ る. This purpose を reached す る た め に, 1 years に "マ ウ ス ear interface born body チ ャ ン バ ー を using し を blood flow with う ヒ ト iPS origin the heart muscle tissue の cropping technology の 発" を subject と し suitable adjustable に carries out す る こ と が で き た. 2 years は, iPS cells を using い た regeneration medical technology を grinding く べ く U.S. へ の study abroad を い, iPS cells の apex research に つ い て の knowledge を deep め, this study に も 応 with で き る 経 験 を product ん だ. 帰 the mesh in (3) after は noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ technology を upward さ せ, こ れ ま で に example の な い high time breakdown can (11 ms/frame) で の noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ に successful し た (in paper submitted). さ ら に noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ の た め の new rules ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス (Tg マ ウ ス) の cropping に を ぎ injection, endothelial に GFP を 発 now す る Tg マ ウ ス (STOCK Tg (TIE2GFP) sato 287 / J) に, immune not omnipotent を た せ る "Tg - immune insufficiency マ ウ ス" の line make を っ た. GFP が 発 now す る Tg マ ウ ス embryo に CRISPR/Cas9 で heritage 伝 subgroups み in え operation を the し 22 horses の 挙 seed を た. Youdaoplaceholder0 続 てジェノタ プを プを プを determination とを, "Tg- immunodeficiency てジェノタ ウス" である とを とを とを とを confirmation た. Youdaoplaceholder0, this study を carried out するために other <s:1> research institutes と なお joint research contract を submitted to わ た た. そ の interstate, transaction party で の book class の や り take り に delay べ か four months above を to し た た め, the research carries out が sharply に 遅 れ た. Make し た "Tg - immune insufficiency マ ウ ス" を い, breeding さ を せ system maintain し, noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ を line い た い と こ ろ で は あ る が, research 遅 delay に よ り be applied す る こ と が で き な か っ た. し か し, noninvasive in vivo イ メ ー ジ ン グ の た め の ノ ッ ク ア ウ ト Tg マ ウ ス を make で き た こ と の meaning は big き く, now, contribute papers を す る preparation line を っ て い る.

项目成果

マウス耳介を用いたがん細胞および血管の非侵襲in vivoイメージング法の確立

建立小鼠耳廓癌细胞和血管无创体内成像方法

• 发表时间: 2017
• 作者: 喜多 清;樋口 秀男
• 通讯作者: 樋口 秀男

Noninvasive in vivo imaging of human cancer cells and mouse vascular endothelial cells in the auricle of mouse.

对小鼠耳廓中的人类癌细胞和小鼠血管内皮细胞进行无创体内成像。

• 发表时间: 2017
• 作者: 喜多 清; 樋口 秀男
• 通讯作者: 樋口 秀男

Novel mouse xenograft model for in vivo imaging in a nanomedicine field

纳米医学领域体内成像的新型小鼠异种移植模型

• 发表时间: 2015
• 作者: Yasushi Hirota;Takehiro Hiraoka;Tomoko Saito-Fujita;Tomoyuki Fujii;Yutaka Osuga;山口えり;Sayaka Kita and Hideo Higuchi
• 通讯作者: Sayaka Kita and Hideo Higuchi