マウス内ｉＰＳ細胞由来心筋の成熟過程と筋芽細胞との融合過程の非侵襲イメージング

本研究の最終目的は、ヒトiPS細胞由来心筋組織をマウス耳介内に移植し、移植した心筋組織が自発的に誘引する血管新生や血流を伴う様子を高精度(>15nm)にかつリアルタイムで非侵襲in vivoイメージングするものである。本目的を達成するために、１年目に「マウス耳介生体チャンバーを利用し血流を伴うヒトiPS由来心筋組織の作製技術の開発」を課題とし順調に遂行することができた。2年目は、iPS細胞を用いた再生医療技術を磨くべく米国への研究留学を行い、iPS細胞の先端研究についての知見を深め、本研究にも応用できる経験を積んだ。帰国後（3年目以降）は非侵襲in vivoイメージング技術を向上させ、これまでに例のない高時間分解能（11ms/frame）での非侵襲in vivoイメージングに成功した（論文投稿中）。さらに非侵襲in vivoイメージングのための新規トランスジェニックマウス(Tgマウス)の作製に力を注ぎ、血管内皮にGFPを発現するTgマウス（STOCK Tg(TIE2GFP)287Sato/J）に、免疫不全能を持たせる「Tg-免疫不全マウス」の作出を行った。GFPが発現するTgマウス胚にCRISPR/Cas9で遺伝子組み換え操作を施し22匹の挙仔を得た。続いてジェノタイプを判定し、「Tg-免疫不全マウス」であることを確認した。なお、本研究を遂行するために他の研究所との共同研究契約を交わした。その際、事務方での書類のやり取りに延べ４か月以上を要したため、研究遂行が大幅に遅れた。作出した「Tg-免疫不全マウス」を用い、繁殖させ系統を維持し、非侵襲in vivoイメージングを行いたいところではあるが、研究遅延により実施することができなかった。しかし、非侵襲in vivoイメージングのためのノックアウトTgマウスを作出できたことの意義は大きく、現在、論文を投稿する準備を行っている。

本研究の最終目的は、ヒトiPS細胞由来心筋組織をマウス耳介内に移植し、移植した心筋組織が自発的に誘引する血管新生や血流を伴う様子を高精度(>15nm)にかつリアルタイムで非侵襲in vivoイメージングするものである。本目的を達成するために、１年目に「マウス耳介生体チャンバーを利用し血流を伴うヒトiPS由来心筋組織の作製技術の開発」を課題とし順調に遂行することができた。2年目は、iPS細胞を用いた再生医療技術を磨くべく米国への研究留学を行い、iPS細胞の先端研究についての知見を深め、本研究にも応用できる経験を積んだ。帰国後（3年目以降）は非侵襲in vivoイメージング技術を向上させ、これまでに例のない高時間分解能（11ms/frame）での非侵襲in vivoイメージングに成功した（論文投稿中）。さらに非侵襲in vivoイメージングのための新規トランスジェニックマウス(Tgマウス)の作製に力を注ぎ、血管内皮にGFPを発現するTgマウス（STOCK Tg(TIE2GFP)287Sato/J）に、免疫不全能を持たせる「Tg-免疫不全マウス」の作出を行った。GFPが発現するTgマウス胚にCRISPR/Cas9で遺伝子組み換え操作を施し22匹の挙仔を得た。続いてジェノタイプを判定し、「Tg-免疫不全マウス」であることを確認した。なお、本研究を遂行するために他の研究所との共同研究契約を交わした。その際、事務方での書類のやり取りに延べ４か月以上を要したため、研究遂行が大幅に遅れた。作出した「Tg-免疫不全マウス」を用い、繁殖させ系統を維持し、非侵襲in vivoイメージングを行いたいところではあるが、研究遅延により実施することができなかった。しかし、非侵襲in vivoイメージングのためのノックアウトTgマウスを作出できたことの意義は大きく、現在、論文を投稿する準備を行っている。