Moelcular identification of human sperm ion channels involved in cell volume regulation

参与细胞体积调节的人类精子离子通道的分子鉴定

基本信息

项目摘要

Es ist erwiesen, dass die Regulation des Zellvolumens eine physiologische Funktion der Spermien ist; die Blockierung dieser Funktion verhindert die Mucus-Penetration. In transgenen Mäusen führt ein solcher Defekt wegen des unterbleibenden Spermientransports im weiblichen Genitaltrakt zur Sterilität. Physiologische Studien mit ionenkanalblockierenden Substanzen an Spermatozoen von Menschen, Primaten und Mäusen weisen auf K+ und Cl- Kanäle als mögliche Kandidaten für die Volumenregulation von Spermien hin, doch sind ihre molekularen Entsprechungen unbekannt und bilden die Zielstellung des vorgeschlagenen Projektes. Menschliche Spermien von Spendern und subfertilen Patienten werden zur Analyse von mRNA, Proteinen und Gesamtzellvolumen eingesetzt. Komplementäre molekulare und physische Ansätze beinhalten das Screening auf mRNA von Kandidatengenen, die Überprüfung spermien-spezifischer Varianten und die Quantifizierung mittels Real-Time-PCR Anschließend werden die Kanalproteine mittels Western-Blot-Analyse weiter charakterisiert und die Molekülgröße ermittelt. Die Fähigkeit individueller Spermienproben zur Volumenregulation wird quantifiziert und mit den molekularen Ergebnissen korreliert um die Identität der involvierten Ionenkanäle aufzuklären. Diese Arbeiten können die Basis zur Entwicklung eines nichtinvasiven, diagnostischen Tests für eine wichtige, neubewertete Spermienfunktion liefern.
这是精子的生理功能调节;阻止粘液渗透的功能。在转基因中,Mäusen führt ein solcher Defekt wegen des unterbleibenden Spermienttranssports im weiblichen Genitaltrakt zur Sterilität。生理学研究男性精子、灵长类动物和雄性精子在 K+ 和 Cl- 中的表现,包括精子体积调节、精子体积调节、分子生物学研究 Zielstellung des vorgeschlagenen Projektes。对 mRNA、蛋白质和整体体积进行分析。筛选 mRNA 的相关分子和物理分析、精子特异变异和定量分析、实时 PCR 分析、蛋白质印迹分析和蛋白质印迹分析 Molekülgröße ermittelt。个体精子探针的体积调节和分子的量化与识别有关。工作原理是在无创的情况下进行诊断、诊断和测试精子功能。

项目成果

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