ヒトｉＰＳ細胞を用いた心筋細胞の運命決定と分化制御メカニズムの解明

使用人 iPS 细胞阐明心肌细胞命运决定和分化控制机制

• 批准号: 16J02610
• 负责人: 大久保 周子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02610/
• 关键词: 心筋細胞; 分化誘導; HAND1; HAND2; 分化; iPS細胞

本研究課題では、ヒトiPS細胞を用いた心筋細胞への分化誘導過程における運命決定メカニズムの解明、心筋細胞のより詳細な種類に関して調査、作製することを目的とした。前年度までに、中胚葉期や胎生期において左室に発現するHAND1と右室に発現するHAND2のレポーターラインを作製した。分化誘導開始5日目にHAND1陽性細胞と陰性細胞に分けられ、HAND1陽性細胞は心筋関連遺伝子の高発現、心筋前駆細胞の表面マーカー陽性を示し、心室筋細胞へとなるにはHAND1陽性になることが必要であることが示唆されたのに対し、HAND1陰性細胞は培養を続けると胚様体中に維持されず心筋細胞には寄与しなことがわかった。平成30年度は、このHAND1の発現は分化誘導3日までに添加するBMP4とActivinAによる中胚葉誘導において発現量が制御されていることが明らかになった。また、HAND1陽性、HAND2陽性、両陽性、両陰性の心筋細胞分画をそれぞれの作製効率を上げる条件を見出し、それぞれどのような性質を有する心筋細胞であるのか評価を行っている。

This study aims to investigate and control the differentiation and induction of cardiac muscle cells in the use of iPS cells. HAND1 and HAND2 occur in the first, middle and fetal stages. 5 days after induction, HAND1 positive cells were separated from HAND 1 negative cells, HAND1 positive cells showed high expression of cardiac muscle related genes, ventricular muscle cells showed high expression of HAND1 positive genes, and HAND1 negative cells were cultured in vitro and maintained in vitro. In the 30th year of Heisei, the development of HAND1 and differentiation induction were inhibited by the addition of BMP4 and ActivA. The results showed that there were no significant differences in the activity of HAND1-positive, HAND2-positive, HAND2-positive, HAND 1-negative and HAND 1-positive cardiac muscle cells.

项目成果

Analysis of expression profile of HAND1 and HAND2 in early cardiogenesis using hiPSCs

使用 hiPSC 分析早期心脏发生中 HAND1 和 HAND2 的表达谱

• 发表时间: 2017
• 作者: Chikako Okubo;Misato Nishikawa;Ikue Takei;Azusa Inagaki;Megumi Narita;Shinya Yamanaka;Yoshinori Yoshida
• 通讯作者: Yoshinori Yoshida

ANALYSIS OF DEVELOPMENT OF LEFT AND RIGHT VENTRICULAR CARDIOMYOCYTES USING HIPSCS

使用 HIPSCS 分析左心室和右心室心肌细胞的发育

• 发表时间: 2016
• 作者: Chikako Okubo;Kenji Miki;Shunsuke Funakoshi;Tadashi Takaki;Takeshi Hatani;Misato Nishikawa;Ikue Takei;Azusa Inagaki;Megumi Narita;Shinya Yamanaka;and Yoshinori Yoshida
• 通讯作者: and Yoshinori Yoshida