動原体微小管動態の in vitro 再構成
着丝粒微管动力学的体外重建
基本信息
- 批准号:16J02807
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2016
- 资助国家:日本
- 起止时间:2016-04-22 至 2019-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
動原体は染色体上に構成される巨大なタンパク質複合体であり、染色体整列に必須の役割を果たす。キネシン-8は生物種を通して保存されたモータータンパク質であり、プラス端に向かって歩行し、動原体微小管の先端に局在を示し、紡錘体微小管の長さ制御および、染色体整列に必須の役割を果たす。しかしその制御メカニズムに関してはよく分かっていない。その理由は相反するものも含めた様々な生化学的活性が報告されているためである。例えば、ヒトキネシン-8, KIF18Aにおいては微小管を安定化するという報告と不安定化するという報告があり、論争がある。本研究では、キイロショウジョウバエのキネシン-8, Klp67Aを用いたin vitro再構成と細胞生物学的なアプローチを通して、動原体微小管の動態制御機構を明らかにすることを目的とした。まずKlp67Aを精製し、微小管動態に与える影響を調べたところ、Klp67Aは、伸長から短縮への転換「カタストロフ」の頻度を増化して、微小管の長さを制限すると同時に、短縮速度を抑制し、微小管の伸縮が見かけ上停止した「ポーズ」および、短縮から伸長への転換「レスキュー」の頻度を増加した。したがってKlp67Aが微小管の不安定化と安定化両方の活性を持つことを、単一の試験管内で再現した。またキイロショウジョウバエS2細胞において、Klp67Aの機能阻害を行い、ライブで詳細に追跡したところ、異常に長い紡錘体を生じ、微小管は先端で動原体と結合できるものの、その結合状態を維持できずに、高頻度で染色体整列に失敗する様子が観察された。このことからKlp67Aは分裂期前中期において、安定な動原体-微小管結合に必要なことが示された。またレスキュー実験から動原体-微小管結合の維持には、Klp67Aの微小管動態の安定化の機能が重要なことが示唆された。
The に on the <s:1> chromosome of the kinetoplasmic organism constitutes the される huge なタ <s:1> パ complex of the nucleus and nucleus であ たす, and the chromosome sequence に must be divided into を fruit たす. キ ネ シ ン - 8 は biological を tong し て save さ れ た モ ー タ ー タ ン パ ク qualitative で あ り, プ ラ に ス end to か っ て step line し, move the original body of tiny tube の apex に bureau in を し, spindle system of tiny tube long の さ royal お よ び, chromosome and に must cut を の service fruit た す. <s:1> そ そ control of メカニズムに relations て よく よく points って って な な な. Youdaoplaceholder0 the reason is the opposite of する する <s:1> する るためである containing めた biochemical activity が report されて されて るためである るためである. Example え ば, ヒ ト キ ネ シ ン - 8, KIF18A に お い て は tiny tube を stabilization す る と い う report と not stabilization す る と い う report が あ り, debate が あ る. This study で は, キ イ ロ シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の キ ネ シ ン - 8, Klp67A を with い た in vitro to constitute と cell biology な ア プ ロ ー チ を tong し て, move the original body of tiny tube の dynamic system of imperial institutions を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. ま ず Klp67A を refined し, tiny tube dynamic に and え る influence を adjustable べ た と こ ろ, Klp67A は, elongation か ら shortening へ の planning in "カ タ ス ト ロ フ" の frequency を raised the し て, long small tube の さ limitations を す る と に at the same time, shortening velocity を し, tiny tube の telescopic が see か け on stop し た "ポ ー ズ" お よ び, shortening か ら Extend へ 転 転 to replace "レスキュ レスキュ" and increase the frequency of を by <s:1> た. Youdaoplaceholder0 たがってKlp67Aが microtube <s:1> destabilization と stabilization <s:1> activity を holding <s:1> とを とを and 単 in one test tube で reproduction of た. ま た キ イ ロ シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ S2 cells に お い て, Klp67A の function line resistance against を い, ラ イ ブ で detailed に tracing し た と こ ろ, abnormal に long い spindle を じ, tiny tube は apex で move the original body と combining で き る も の の, そ の combining state を maintain で き ず に に failure in line, high frequency で chromosomes す る others child が 観 examine さ れ た . こ の こ と か ら Klp67A は divide the former に お い て, stable な agents body - tiny tube combined with に necessary な こ と が shown さ れ た. ま た レ ス キ ュ ー be 験 か ら agents body - tiny tube combined with の maintain に は, Klp67A の tiny tube dynamic の stabilization の function が important な こ と が in stopping さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
ショウジョウバエにおいて動原体と微小管の安定な結合にはキネシン8が必要である
果蝇中着丝粒和微管的稳定结合需要驱动蛋白 8
- DOI:
- 发表时间:2017
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Edzuka Tomoya;Goshima Goshima;江塚智哉
- 通讯作者:江塚智哉
Drosophila kinesin-8 has a microtubule depolymerisation activity and is required for stablekinetochore-microtubule attachment
果蝇驱动蛋白-8 具有微管解聚活性,是稳定动粒-微管附着所必需的
- DOI:
- 发表时间:2016
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Edzuka Tomoya;Goshima Goshima;江塚智哉;Tomoya Edzuka
- 通讯作者:Tomoya Edzuka
Drosophila kinesin-8 stabilizes the kinetochore-microtubule interaction
- DOI:10.1083/jcb.201807077
- 发表时间:2019-02-01
- 期刊:
- 影响因子:7.8
- 作者:Edzuka, Tomoya;Goshima, Gohta
- 通讯作者:Goshima, Gohta
ショウジョウバエのキネシン-8および動原体外表因子を用いた動原体微小管動態の再構成
使用果蝇驱动蛋白 8 和着丝粒外表面因子重建着丝粒微管动力学
- DOI:
- 发表时间:2016
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Edzuka Tomoya;Goshima Goshima;江塚智哉;Tomoya Edzuka;江塚智哉
- 通讯作者:江塚智哉
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