軟骨細胞におけるＩｈｈの発現制御機構の解明

软骨细胞Ihh表达调控机制的阐明

• 批准号: 16J03826
• 负责人: 山川 晃
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J03826/
• 关键词: Indian hedgehog; 発現制御

本年度は、CRISPR/Cas9を用いて作出した領域Aを欠失したマウスを用いて、胎生期における領域AのIhh遺伝子発現への寄与を検証した。まず、E18.5の胎仔を用いて、whole mount skeletal double stainingと脛骨近位の骨組織に対するヘマトキシリン・エオシン染色とvon Kossa染色を行った。その結果、領域Aのホモ欠失マウスではIhhノックアウトマウスで認められる骨殻の形成不全、成長板における軟骨細胞の分化過程の異常は認められなかった。次に、Ihh遺伝子の発現量を野生型マウスと領域Aのホモ欠失マウスのE18.5胎仔間で比較したところ、領域Aのホモ欠失マウスでは野生型に比べて5％程度のコピー数の減少を認めるのみで統計学的有意差を認めなかった。以上の結果より、胎生期における領域A単独の欠失がIhh遺伝子発現へ与える影響はわずかであり、Ihhの発現制御においては、複数のエンハンサーによって各々の機能を補完しあうエンハンサーネットワークが存在することが示唆された。領域Aにおけるエンハンサー活性の制御機構に関する検討では、今回新たにマウス新生仔肋軟骨細胞におけるSox6のChIPシークエンスを行い、得られたデータを解析した。その結果、Sox6は軟骨細胞において遠位エンハンサーのSoxモノマーモチーフを介して軟骨形成に関与する遺伝子群の転写制御に関与している可能性が示唆された。さらに領域AでSox6のピークを認めたことから、Sox6とSox9は共に領域Aに作用することが示唆された。これまでの、一連のゲノムワイドな解析により得られた結果は、領域Aの活性制御にSox trioが関与している可能性を支持するものであった。

This year, CRISPR/Cas9 has been used to create the field A, the field A is missing, and the field A is used in the fetal period.まず, E18.5 fetuses were stained with いて, whole mount skeletal double staining and proximal tibia bone tissue were stained with von Kossa staining.そのRESULTS, AREA A のホモowed マウスではIhhノックアウトマウスで见められるInsufficient formation of the bone shell and abnormal differentiation process of chondrocytes in the growth plate are recognized. Time, Ihh left 伝子の発 Present amount, wild-type マウスとfield A のホモowed マウスのE18.5 inter-fetal comparison したところ, field There is a significant statistically significant difference in the number of wild-type wild-type animals compared to the wild-type animals. The result of the above is the result of the birth period, and the field of the birth period is the area of the single single and missing.おいては、plural のエンハンサーによってeach々のfunctionをcompleteしあうエンハンサーネットワークがexistent することが说憆された. Field AにおけるエンハンサーActivity control mechanism に关する検question では, this time the new たにマウス freshman Costal chondrocyte におけるSox6のChIPシークエンスを行い、getられたデータをanalyticsした.そのRESULTS, Sox6はchondrocytesにおいてdistal エンハンサーのSoxモノマーモチーフThe cartilage formation cartilage is formed by the cartilage and the cartilage is formed by the cartilage.さらに区AでSox6のピークをcognitionめたことから、Sox6とSox9は公に区Aにeffect することが见唆された.これまでの、一连のゲノムワイドなanalyticsによりgetられたRESULTは、Field AのActivity ControlにSox The trio is closed and the possibility is supported by the trio.

项目成果

軟骨細胞特異的なIhhのエンハンサーの同定とSox9によるその活性化機構

Sox9鉴定软骨细胞特异性Ihh增强子及其激活机制

• 发表时间: 2017
• 作者: Jean-Emile Bourgine;Masayuki Fukuda;Yutaka Matsuo;Hong Zhang;Rui-Dong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;朱睿東;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃
• 通讯作者: 山川 晃

Regulatory mechanisms underlying Ihh transcription in chondrocytes

软骨细胞 Ihh 转录的调控机制

• 发表时间: 2016
• 作者: Jean-Emile Bourgine;Masayuki Fukuda;Yutaka Matsuo;Hong Zhang;Rui-Dong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;朱睿東;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;朱睿東;山川 晃;Rui-Dong Zhu;山川 晃
• 通讯作者: 山川 晃

Enhancer network for Ihh transcription in chondrocytes

软骨细胞中 Ihh 转录的增强子网络

• 发表时间: 2017
• 作者: Jean-Emile Bourgine;Masayuki Fukuda;Yutaka Matsuo;Hong Zhang;Rui-Dong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;山川 晃
• 通讯作者: 山川 晃

軟骨細胞におけるエンハンサーネットワークを介したIndian hedgehogの発現制御機構

通过软骨细胞增强子网络调节印度刺猬表达

• 发表时间: 2017
• 作者: Jean-Emile Bourgine;Masayuki Fukuda;Yutaka Matsuo;Hong Zhang;Rui-Dong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃
• 通讯作者: 山川 晃

軟骨細胞におけるIndian hedgehogの発現制御機構

印度刺猬在软骨细胞中表达的调控

• 发表时间: 2016
• 作者: Jean-Emile Bourgine;Masayuki Fukuda;Yutaka Matsuo;Hong Zhang;Rui-Dong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;朱睿東;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃;Ruidong Zhu;山川 晃
• 通讯作者: 山川 晃