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べん毛モーターのＦｌｉＬとＦｌｉＧの構造を基盤としたトルク産生機構解明

基于鞭毛马达FliL和FliG结构阐明扭矩产生机制

基本信息

批准号：
16J03916
负责人：
西野優紀
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J03916/
关键词：
べん毛エネルギー変換 FliL FliG 立体構造解析べん毛モーター NMR 構造学的解析

项目摘要

べん毛モーター回転子蛋白質FliGについての構造解析の研究を進めた。FliGの動的な構造変化を検出するために、FliGのC末端ドメインの断片を精製し、溶液NMR法を用いた解析を行った。また、海洋性ビブリオ菌、Vibrio alginolyticusにおいては、C末端ドメインにおける、運動能に大きな影響を与える変異体が複数単離されていたため、そのFliGのC末端ドメインに該当の変異を導入した断片を精製し、野生型と溶液NMR法を用いた解析の結果をそれぞれ比較した。その結果、初めてFliGのC末端ドメインの帰属に成功し、変異体においても帰属が成功した。それらの溶液NMR法の結果と、分子動力学シミュレーションを用いた構造解析の結果を統合することで、野生型ではコンフォメーション変化が起こるのに対し、回転方向が反時計回りに偏りが生じる変異体では、コンフォメーション変化が起こりにくいことが判明した。それらの結果から、べん毛の回転方向転換とFliGのコンフォメーション変化が密接に結びついていることがわかった。これまでに得られた結果を共同研究者らと共に、研究をまとめた原著論文を著名な海外雑誌に発表することができた。本研究員は、以上より概ね期待通りの成果を挙げている。さらに、本研究員が主体として進めたFliLの複数のアプローチによる機能解析の研究においては、研究を少しずつ進め、十分な量のデータは得られている。ただ、その結果から得られた仮説がまだ不十分で、さらなる議論や追加の実験等がそれぞれ必要だと感じている。そのため、報告書提出期間内に、研究成果を論文としてまとめることはできなかった。しかし、本研究員が共著者であるFliLの構造解析に関して、その研究の一部が論文になっている。従って、この研究に関しても、ほぼ期待通り程度の成果は得られたと考えている。

A Study on the Structural Analysis of FliG Protein in the Hematosome The structure of FliG was analyzed by NMR, and the C-terminal fragment of FliG was purified. The results of the analysis were compared with those of the analysis of the C-terminal fragment of Vibrio alginolyticus. As a result, the C-terminal part of the FliG was successful, and the C-terminal part of the FliG was successful The results of solution NMR, molecular dynamics and structural analysis were integrated. The results of wild-type NMR were analyzed in reverse time. The result of this is that the direction of rotation of the hair is changed, and the connection is closed. The results obtained can be published by co-researchers, and the original papers of the research can be published in famous overseas journals. This researcher is looking forward to the results of the above discussion. This researcher has made great progress in the study of functional analysis of FliL. The result of the discussion is that the discussion is not complete, and the discussion is complete. During the period when the report was submitted, the research results were published. The author of this paper is related to the structural analysis of FliL. The results of this research are expected to be achieved in the future.