Einzelmolekülspektroskopische Untersuchung der Transportvorgänge im Kernporenkomplex mit Hilfe biomimetrischer Modelle

使用生物模拟模型对核孔复合体中的运输过程进行单分子光谱研究

• 批准号: 5445651
• 负责人: Professor Dr. Dirk-Peter Herten
• 金额: --
• 依托单位: School of Chemistry
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5445651?language=en
• 关键词: Einzelmolek; lspektroskopische; Untersuchung; der; Transportvorg

Der erleichterte Transport von Proteinen und Ribonukleinsäuren zwischen Zell- und Kernplasma durch die Kernpore (NPC) wird z. Zt. durch verschiedene Modelle beschrieben, denen u.a. nicht klar definierte Wechselwirkungen zwischen den hydrophoben Anteilen stationärer Peptidketten (FG-Repeats) und den hydrophoben Taschen von Transportrezeptoren zu Grunde gelegt werden. Diese Wechselwirkungen, die in allen bekannten Modellen eine entscheidende Rolle spielen, sollen isoliert durch Methoden der optischen Einzelmolekülspektroskopie an zunächst einfachen biomimetischen Modellen wie ebenen beschichteten Oberflächen untersucht werden. Im Mittelpunkt der Untersuchungen stehen die Mobilitäten der löslichen Transportfaktoren auf Oberflächen, die mit unterschiedlichen FG-reichen Proteinen aus Kernporen beschichtet sind, sowie der Einfluss weiterer löslicher Co-Faktoren aus Zell- und Zellkernlysaten auf die beobachtete Kinetik. Im weiteren Verlauf soll auf porenähnlichere Systeme wie beschichtete Mikrokapillaren und später Porenfilter übergegangen werden, um sich den Transportbedingungen innerhalb des NPC anzunähern. Zur Untersuchung dieser dynamischen Prozesse im Bereich von 10-6-10-3s kommen die spektrale und zeitaufgelöste Einzelmolekülmikroskopie auch unter evaneszenter Anregung und die konfokale Fluoreszenzkorrelationsspektroskopie (FCS) zum Einsatz. Durch die Kombination der FCS mit Rasterscanningverfahren soll die direkte Abbildung von Diffusions- und Konzentrationsgradienten erreicht werden.

策尔-和核浆体通过核孔（NPC）的蛋白质和核糖体的快速转运。Zt.通过verschiedene Modelle beschrieben，来自美国没有明确的疏水蛋白固定肽（FG-重复序列）和疏水蛋白转运载体（韦尔登）之间的相互作用。这种选择，在所有的模型中，都有一个合适的角色，通过最优化的分子光谱方法，就可以得到一个生物模拟模型，就像韦尔登的表面一样。在研究的中间点上，主要是为了提高运输工具在空中的机动性，而在核心孔中加入不稳定的FG-重组蛋白质，因此，策尔-和策尔核心孔对运输工具的协同作用影响很大。在另一个版本中，Verlauf soll auf porenähnlichere System wie beschichtete Mikrokapillaren und später Porenfilter übergegangen韦尔登，um sich den Transportbedingungen innerhalb des NPC anzunähern.在10-6-10- 3的基础上进行的动力学研究表明，该系统的光谱和时间分辨率也可以通过增强的Anregung和增强的konfokale Corzenzcorrelations光谱（FCS）来实现。采用光栅扫描的FCS组合可直接消除韦尔登和衍射梯度。