权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

犬の色素性角膜炎に対する培養角膜上皮細胞シートを用いた獣医再生医療の試み

使用培养的角膜上皮细胞片治疗犬色素性角膜炎的兽医再生医学试验

基本信息

批准号：
17J06460
负责人：
黒田晃平
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

現在の獣医臨床領域において培養上皮角膜シート移植による角膜再生医療は実施されていない。そこで、ウサギを用いて培養角膜上皮シート移植による角膜再生医療の検討を行った。当研究室で作製した培養上皮角膜シートの性状を病理学的検査により確認した。ブタ角膜薄切片上でイヌ角膜上皮細胞が数層にわたり増殖していることが確認された。また角膜上皮マーカーである CK3 およびCK12の発現が確認された。基底膜付近には角膜上皮幹細胞マーカーといわれているp63およびABCG2の発現が確認された。次にウサギの角膜表層に欠損を作製し、細胞を播種していないブタ角膜薄切片の移植を実施した。移植後10日で採材し、病理学的検査に供した。移植後のスリットランプ検査において、顕著な血管新生や炎症反応といった拒絶を疑う所見は認められなかった。フルオレセイン染色では日を追うごとに陽性領域の縮小が認められた。また移植片は移植後10日の時点で癒合している様子が認められた。しかし、顕著な透明性の改善は認められなかった。病理学的検査では移植片上に宿主の角膜上皮細胞の伸展が認められた。移植片と宿主角膜の境界には線維化が確認された。この結果を踏まえて、ウサギ角膜に同様の手法で培養角膜上皮シートの移植を実施した。移植後10 日で採材し、病理学的検査に供した。移植後のスリットランプ検査において顕著な血管新生や炎症反応といった拒絶を疑う所見は認められなかった。フルオレセイン染色では移植直後より陽性領域は辺縁に認められるのみであった。しかし、複数の個体において移植後数日で移植片全体が陽性となった。これは角膜上皮細胞がシートより剥離してしまったことが原因と思われる。現在、採材した眼の病理学的評価を実施している。

Now, in the clinical field of medicine, corneal epithelial transplantation and corneal regeneration are carried out in China. The study of corneal regeneration therapy is carried out in the culture of corneal epithelium and transplantation. Pathological examination of cultured corneal epithelial cells was performed in the laboratory to confirm their properties. Corneal epithelial cells were found in several layers on thin sections of cornea. Corneal epithelium was identified by CK3 and CK12. The discovery of p63 and ABCG2 in corneal epithelial stem cells near the basement membrane was confirmed. The next step is to control the damage of the corneal surface layer, and to transplant thin corneal sections with cell seeding. 10 days after transplantation, the specimens were collected and examined pathologically. After transplantation, the blood vessels and inflammation were examined and rejected. The color of the sun is red, and the color of the sun is red. The graft healed 10 days after transplantation. The transparency of the film was improved. Pathological examination revealed that the host corneal epithelial cells on the graft were extended. Transplant and host cornea boundary line maintenance is confirmed. The results showed that the corneal epithelium was cultured and transplanted in the same way. 10 days after transplantation, the specimens were collected and examined pathologically. After transplantation, the blood vessels and inflammatory reactions were detected and rejected. The color of the flowers is red, and the flowers are red. A few days after transplantation, all the grafts were positive. Corneal epithelial cells are removed from the cornea. Now, the evaluation of ocular pathology is carried out.