腎尿細管再吸収の動的機能解析による慢性腎臓病発症メカニズムの解明

通过肾小管重吸收的动态功能分析阐明慢性肾脏病发生的机制

• 批准号: 18J12813
• 负责人: 浦江 聖也
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J12813/
• 关键词: Cubilin; amnionless; NVL; albumin; endocytosis; cubilin; imerslund-grasbeck症候群; albuminuria; proteinuria; anemia

これまでに我々は培養細胞HEK293TでAMNと共に全長CUBNを発現させることで、CUBN/AMN受容体によるアルブミン取込みを評価する実験系を構築した。またCUBN/AMN受容体の新規結合蛋白であるNVL(nuclear valosin-containing protein-like)がCUBN/AMN受容体のエンドサイトーシス及びリガンド取込みを促進していることを明らかにした。今年度我々はNVLとCUBN/AMN受容体の相互作用の分子機構解明のため、NVLが持つATPaseとしての機能が受容体輸送制御に寄与するかについて探求した。具体的にはATPase機能を喪失させるE365Q/E682Q変異NVLをドキシサイクリン誘発性にHEK細胞で発現させ、CUBN/AMN受容体によるアルブミン取込みに対する影響を調べたところ、正常型NVLを発現させた場合に比べて有意にアルブミン取込みの抑制が見られた。このことからCUBN/AMN受容体によるリガンド取込みにはNVLのATPaseとしての機能が必要であることが示唆された。NVLはこれまで核内に局在し、リボソーム合成やテロメアーゼ活性に関わると報告されていた。NVL分子の多様な機能はこれまで全て培養細胞実験系で検証されており、生体内でNVLが果たす役割は知られていない。今後我々はNVL2ノックアウトマウスの表現型解析を行うことで、NVL2の生体内での機能解明を目指しており、文科省先端学術領域先端モデル動物支援プラットフォームの支援をうけ、現在F1世代(NVL2+/-マウス♂)作成済みである。

こ れ ま で に I 々 は culture cell HEK293T で AMN と total length に CUBN を 発 now さ せ る こ と で, CUBN/AMN let body に よ る ア ル ブ ミ ン take 込 み を review 価 す る be 験 department を build し た. ま た CUBN/AMN by let body の new rules binding protein で あ る NVL (nuclear valosin - containing protein - like) が CUBN/AMN by let body の エ ン ド サ イ ト ー シ ス and び リ ガ ン ド take 込 み を promote し て い る こ と を Ming ら か に し た. This year I 々 は NVL と CUBN/AMN by let body の の molecular interaction between institutions and interpret の た め, NVL が hold つ ATPase と し て の function が royal に send let body conveying system and す る か に つ い て explore し た. Loss function of specific に は ATPase を さ せ る E365Q/E682Q - different NVL を ド キ シ サ イ ク リ ン 発 sex lure に HEK cells で 発 now さ せ, CUBN/AMN let body に よ る ア ル ブ ミ ン take 込 み に す seaborne る influence を adjustable べ た と こ ろ, normal NVL を 発 now さ せ に た occasion than べ て intentionally に ア ル ブ ミ Youdaoplaceholder1 take 込み and 込み for inhibition が see られた. こ の こ と か ら CUBN/AMN by let body に よ る リ ガ ン ド take 込 み に は NVL の ATPase と し て の function が necessary で あ る こ と が in stopping さ れ た. NVL は こ れ ま で に bureau in し inside nuclear, リ ボ ソ ー ム synthetic や テ ロ メ ア ー ゼ active に masato わ る と report さ れ て い た. NVL molecular の others more な function は こ れ ま で full て culture cell be 験 department で 検 card さ れ て お り, born in vivo で NVL が fruit た す "cut は know ら れ て い な い. I 々 は NVL2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の phenotype parsing line を う こ と で, NVL2 の born in vivo で の function interpret を refers し て お り, arts province apex academic field apex モ デ ル animals support プ ラ ッ ト フ ォ ー ム の support を う け, now F1 generation NVL2 (+ / - マ ウ ス ♂) made 済 み で あ る.

项目成果

核小体蛋白による膜受容体輸送制御機構

核仁蛋白的膜受体转运控制机制

• 发表时间: 2019
• 作者: Seiya Urae;Yutaka Harita;Tomohiro Udagawa;Koji Ode;Hiroki R. Ueda;Masami Nagahama;Masaomi Nangaku;Akira Oka
• 通讯作者: Akira Oka

The cellular model of albumin endocytosis uncovers link between membrane and nuclear proteins

白蛋白内吞作用的细胞模型揭示了膜蛋白和核蛋白之间的联系

• DOI: 10.1242/jcs.242859
• 发表时间: 2020
• 期刊: Journal of Cell Science
• 影响因子: 4
• 作者: Urae Seiya;Harita Yutaka;Udagawa Tomohiro;Ode Koji L.;Nagahama Masami;Kajiho Yuko;Kanda Shoichiro;Saito Akihiko;Ueda Hiroki R.;Nangaku Masaomi;Oka Akira
• 通讯作者: Oka Akira

核小体蛋白によるアルブミンエンドサイトーシス制御機構

核仁蛋白的白蛋白内吞控制机制

• 发表时间: 2019
• 作者: 浦江 聖也;張田 豊;宇田川 智宏;大出 晃士;長浜 正巳;上田 泰己;南学 正臣;岡 明
• 通讯作者: 岡 明

NVLノックアウトマウス解析による多機能分子NVLの生体内機能解析

使用 NVL 敲除小鼠分析对多功能分子 NVL 进行体内功能分析

• 发表时间: 2020
• 作者: 浦江聖也;張田豊;中山ひとみ;高野洋志;八尾良司;南学正臣;岡明
• 通讯作者: 岡明

Nuclear valosin-containing protein-like(NVL)は Amnionlessと結合し Cubilinのエンドサイトーシスを制御する

核内含有缬氨酸的蛋白样 (NVL) 与 Amnionless 结合并控制 Cubilin 的内吞作用。

• 发表时间: 2018
• 作者: 浦江聖也;張田豊;宇田川智宏;大出晃士; 長浜正巳;南学正臣;岡明
• 通讯作者: 岡明