質量分析法による原生生物の種組成解析に基づいた農業集落排水水質判定法の開発

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究は排水施設の原生生物を迅速に同定分類し，水処理の状態を低コストで素早く判定するための基盤を構築することを目指している。コロナ感染症の影響により，対象施設が利用できず当初から別施設に変更して調査を行っていたが，変更後の施設でのデータが蓄積してきたため，このまま継続してデータ解析を続けることとした。研究の内容は大きく次の４つに分けられる．①サンプリングした原水の水質測定，②出現原生生物種の観察同定，③活性汚泥中の原生生物の遺伝情報解析，④活性汚泥中の原生生物の質量分析解析．水質測定については，排水施設では一般的に計測されている水質項目を網羅的にカバーしている．これらのデータは，水処理施設で従来の運転状況判断の根拠となるデータであり，さらに本実験で運転状況判断との比較をするべき重要な基礎データである．種同定については，光学顕微鏡観察のほかに水凍結乾燥法を用いた試料作製を行い，走査型電子顕微鏡で観察した。その結果，この排水施設は出現種がほぼ一般的な種で構成されていることが明らかになり，種組成もある程度一般化して考察することができると考えられる．遺伝情報を用いた迅速な種組成判定に関しては，原生生物用のユニバーサルプライマーを設計してPCRを行い，リボソーム18Sを中心とした遺伝情報の収集を行っている。今年度は解析結果が安定しつつあり，さらに，V9領域に着目することで，効率的に種分類がおこなえることが明らかになっており，原生生物の種組成を明らかにするうえで有効な手段となると考えられる．質量分析についてはまだ安定した解析結果が得られていない。一歩立ち返って，単離培養中の原生生物を試料として測定し，比較することで，違いを明らかにするところから進めている．