血管内皮網付膵島β細胞シートによる膵臓様組織構築法の確立

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本研究は、血管内皮網付膵島β細胞シートの作製プロトコールを確立するとともに、血管内皮網付膵島β細胞シートを皮下に段階的に積層移植することで厚い膵臓様組織を構築することを目的とする。血管内皮網付膵島β細胞シートにより皮下に厚い膵臓様組織を構築できることを証明するために、『①血管内皮網付膵島β細胞シート作製条件の適正化、②血管内皮網付シートの組織内血管網構築能の検証、③構築した膵臓様組織機能の評価』の実験を行う。①に関しては、昨年度までに当初の目的を達成したため、本年度は②を中心に行った。本年度は厚い膵島様組織を構築するための血管内皮網付細胞シート（以下、細胞シート）積層法の検討を中心に行った。厚い膵島様組織を作製するために、１度に移植できる細胞シートの枚数を検討したところ、３枚までは血流豊富な膵島様組織として生着することを確認できた。次に、更に厚い組織を構築するために、ラットへの段階的積層移植を行った。段階的移植とは、細胞シート移植後数日後に再度細胞シートを移植していく方法である。積層間隔を2日として移植したところ、2回目の積層移植分が生着しないことが判明した。原因として、最初に移植した細胞シート内への血流が不十分であったことが考えられた。また、③に関しては、CTZ誘発糖尿病ラットモデル作製のための、CTZ投与量を決めることができた。CTZ誘発糖尿病モデルラット作製プロトコールを完成させることで、次年度以降の研究の準備を整えることができた。