权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

糖尿病黄斑浮腫に対する閾値下レーザー治療のモニタリングマーカー確立

阈下激光治疗糖尿病黄斑水肿监测标志物的建立

基本信息

批准号：
21K12762
负责人：
周尾卓也
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hokuriku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では，糖尿病黄斑浮腫の治療有効性をモニタリングできる分子マーカーとして，閾値下レーザーの標的分子と同調する細胞外液性因子を選別し，医用質量分析の多重反応モニタリング法に適用可能な候補を提案する．高分解能精密質量分析装置を利用して，ヒト網膜色素上皮のセクレトームをメタボロミクス法とプロテオミクス法によって探究している．ヒトiPS分化細胞を，透過膜に集密的に播種し，無血清培地中で40日間以上培養することで，敷石状で黒褐色の網膜色素上皮シートを調製した．臨床での高血糖値を想定したグルコース濃度の培地中で30日間以上培養することで，糖尿病モデル網膜色素上皮を調製した．閾値下レーザーの照射から12時間後まで，網膜色素上皮の培養上清液を，1時間毎に採取した．比較の対象を意図して，ブタ網膜色素上皮の培養を新たに開始した．培養上清中の代謝物を包括的に解析するために，高速液体クロマトグラフィーと連結した高分解能精密質量分析（四重極飛行時間型）装置でメタボロミクス法を実行した．細胞に共通する一次代謝を標的として，質量分析に供する培養上清の前処理条件（除タンパクや希釈倍率）と液体クロマトグラフィー条件を決定した．高分解能精密質量分析装置で検出した化合物に対して，多重反応モニタリングMRMのためのメソッド（プレカーサーイオンとそのプロダクトイオンの質量電荷比）を作成し，このメソッドを高感度高速質量分析（三連四重極型）装置に適用して，測定作業の効率化を図った．メタボロミクス法で得られた多変量データを，ウェブベースのMetaboAnalyst 5.0ソフトウェアを活用して，PCA主成分分析およびPLS部分的最小二乗回帰によって内容を分類した．

This study では, diabetic macular edema の treatment have sharper をモニタリングできる molecular マーカーとして, threshold under nt レーザーの target molecules と homology する extracellular fluid factors をし, medical quality analysis の multiple anti 応モニタリンにグ law may な alternate proposals をする. High decomposition can を precision quality analysis device using して, ヒト retinal pigment epithelium のセクレトームをメタボロミクス method とプロテオミクス method によって explore している. ヒト iPS cell differentiation を, through membrane に set close に seeding しで over 40 day in serum-free culture to cultivate することで, apply the stone shape で of retinal pigment epithelium (black brown のシートを modulation した. On clinical での hyperglycemia numerical を scenarios したグルコーのス concentration in the petty で above 30 day training することで, diabetes モデル retinal pigment epithelium を modulation した. Under the threshold, レ, ザ and <s:1> are irradiated for までら for 12 hours, followed by まで. The supernatant of the retinal pigment epithelium <s:1> culture is を, and for 1 time, に are taken for た. A comparison of <s:1> pairs of を indicates て, ブタ retinal pigment epithelium <s:1> culture を new たに begins たた. Culture supernatant の metabolites を include に resolution するために, high-speed liquid クロマトグラフィーと link した precision quality analysis can decompose (quad a flight time) device でメタボロミクス method を line be した. Common cell にする a metabolic を mark として, quality analysis for すにる culture supernatant の処 principle conditions before (except タンパクや bush 釈 ratio) と liquid クロマトグラフィをー conditions decide した. High decomposition can precision quality analysis of で検 out した compound にし seaborne て, multiple anti 応モニタリング MRM のためのメソッド (プレカーサーイオンとそのプロダクトイオンの quality charge ratio) をし consummate, このメソッドを Gao Gan degree high quality analysis (three even four heavy pole type) device に applicable して, To determine the efficiency of the operation, を graph った. メタボロミクス method to でられた many variations データを, ウェブベースの MetaboAnalyst 5.0 ソフトウェアを use して, PCA principal component analysis (および PLS partial least squares back 帰によって content を classification した.