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Streptococcus mutansが関与する脳血管疾患発症機序の解明

阐明变形链球菌脑血管疾病的发病机制

基本信息

批准号：
22K10352
负责人：
村田貴俊
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tsurumi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10352/
关键词：
Streptococcus mutans 脳卒中コラーゲン結合タンパク

项目摘要

コラーゲン結合タンパクを発現するStreptococcus mutans（ミュータンス菌）感染と脳卒中発症との関連が報告されている。このコラーゲン結合タンパクは、細胞壁を構成するペプチドグリカンと共有結合し、ミュータンス菌最外層に存在している。一方、脳卒中罹患部からのミュータンス菌体単離の報告はないことから、菌体そのものではなく、菌体外に分泌、または剥離するコラーゲン結合タンパクが病原因子である可能性がある。これまでの研究成果として、ミュータンス菌培養上清中にコラーゲン結合タンパクを含む複合体をウェスタンブロッティング法で確認している。研究当該年度には、ミュータンス菌培養上清からコラーゲン結合タンパク複合体の単離・同定を試みた。その方策として、抗コラーゲン結合タンパクポリクローナル抗体を作製し免疫沈降法を行い単離を試みた。しかしながら、使用した抗体とミュータンス菌が分泌するグルコシルトランスフェラーゼが交差反応を示し、質量分析法によるコラーゲン結合タンパク複合体の同定を阻害することが判明した。この問題を解決するため、ミュータンス菌が有する3種類全てのグルコシルトランスフェラーゼ遺伝子を破壊したミュータンス菌株を作製した。この株の培養上清には抗体と交差反応を示すグルコシルトランスフェラーゼを全く含まないため免疫沈降法によるコラーゲン結合タンパク複合体単離を容易にする。その後の質量分析法による同定に資するサンプルが得られるはずである。

The combination of clinical data and clinical data showed that Streptococcus mutans infection caused stroke symptoms, stroke symptoms, reports of stroke, and clinical symptoms. There is a common bond between the cells and the cell wall, and there is a presence in the outermost part of the bacteria. On the one hand, in the stroke affected area, the bacteria were isolated, the bacteria were secreted in vitro, and the bacteria were isolated from the stroke. the possibility of pathogens was not affected. The results of the research were reviewed, and the supernatant of bacteria culture was confirmed by the method of confirming the infection of the bacteria. In this year's study, the supernatant of bacteria was isolated from the supernatant and the complex of bacteria was isolated and identified in this year. The immune sedimentation method was used to carry out the isolation test by using the method of immunoprecipitation combined with the combination of anti-virus and anti-virus. The antibody was used to detect the infection, and the antibody was used to secrete the antibody. The antibody was secreted by the bacteria, and the cross-section was detected by quantitative analysis. The combination of the complex was detected by quantitative analysis. In order to solve the problem, there are three kinds of bacteria that can be used to solve the problem. there are three kinds of bacteria that can be used to solve the problem. The supernatant of the strain was cultured and the antibody was detected in the supernatant. The antibody was detected in the supernatant, and the antibody was detected in the supernatant of the supernatant. The immunoprecipitation method showed that it was easy to isolate the complex. After that, the method of quantitative analysis was used to calculate the accuracy of the data analysis method.