Cartilage protection by mechanical stress - changes of Exosome contents-

机械应力对软骨的保护-外泌体含量的变化-

• 批准号: 19K09627
• 负责人: 大月 孝志
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: National Defense Medical College (2023)Okayama University (2019-2020)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-11-15 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19K09627/
• 关键词: エクソソーム; メカノセンサー; マトリックス; 軟骨細胞; miRNA; 変形性関節症; 細胞外小胞; 炎症性サイトカイン; 軟骨; メカニカルストレス; 細胞外マトリックス

軟骨細胞に対し炎症性サイトカイン（Interleukin-1β（IL-1β））、炎症性サイトカイン＋メカニカルストレスを加え軟骨細胞が培地中に産生するエクソソームを回収し、含有するmiRNA、エクソソーム自身を構成するタンパクを解析する。miRNAの解析はRNA-seqにて行い、エクソソームタンパク構成の解析はマス分析にて行う。miRNA解析に必要なエクソソーム、培養上清の量を割り出しパイロット分析を行っている。また、マス分析でも同様に必要量を割り出しサンプル処理、少量によるパイロット分析まで行っている。また、培養上清から回収したエクソソームを軟骨細胞の培養液に添加して軟骨細胞の再生するマトリックス分解酵素、マトリックス構成成分の発現量の変化をRT-qPCR法にて検出した。現時点では無処理の軟骨細胞培養上清、サイトカインした軟骨細胞培養上清における作用に違いは見られていない。回収したエクソソームは容易に凝集体を形成することが粒子径分布測定で確認されている。粒子径分布と粒子数の両方を揃えることでより正確にサイトカイン処理によるエクソソームの作用の変化を議論する必要があることが分かってきた。細胞レベルでのエクソソームの変化を見出した後に、ラット変形性関節症モデルにエクソソームを投与することで、臨床応用の為の基礎データを収集する予定である。詳細な解析を行うには更に多くの培養上清、培養期間が必要となるが、以降は海外留学より帰国してから再開したい。

Chondrocytes respond to inflammatory cytokines (Interleukin-1β (IL-1β)), inflammatory cytokines + cytokines, and chondrocytes in culture. miRNA analysis is carried out in RNA-seq mode, and the analysis is carried out in the composition mode. miRNA analysis is necessary to determine the amount of miRNA in culture supernatant. For example, the amount of water required for the analysis of the soil is 100% of that required for the analysis of the soil. The production of chondrocytes by adding enzymes and components to culture supernatant was detected by RT-qPCR. At present, there is no treatment of chondrocyte culture supernatant, chondrocyte culture supernatant. It is easy to form aggregates and to determine the particle size distribution. Particle size distribution and particle size distribution are discussed in detail. The changes in the cellular system and the changes in the clinical system are expected to occur after the changes in the cellular system and the changes in the clinical system. Detailed analysis: more culture supernatant, culture period, study abroad, reopening

项目成果

変形性関節症に有効な新規化合物の探索

寻找有效对抗骨关节炎的新化合物

• 发表时间: 2020
• 作者: 中野 愛梨;稲垣純子;大月孝志;兒玉慎太郎;オメル・F・ハティポ-ル;池村 健太郎;安藤 亮典;畑本 早紀子;立木美穂;ガブリエル オポク;西田圭一郎;廣畑 聡
• 通讯作者: 廣畑 聡

IL-1beta treatment up-regulated CD9 in exosome and chondrocyte

IL-1β治疗上调外泌体和软骨细胞中的CD9

• 发表时间: 2019
• 作者: Yan Wanyu;Shintaro Kodama;Liu Guole;Takashi Ohtsuki;Omer Faruk Hatipoglu;Takuto Nishimura;Miho Tachiki;Junko Inagaki;Hiroshi Yamada;Takayuki Furumatsu;Keiichiro Nishida;Liankun Sun;Satoshi Hirohata
• 通讯作者: Satoshi Hirohata

The Mechanism of Cardioprotective Effect of Eosinophil Cationic Protein in Anticancer Drug- induced Cardiotoxicity Model

抗癌药物心脏毒性模型中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的心脏保护作用机制

• 发表时间: 2020
• 作者: Takuto Nishimura;Miho Tachiki;Takashi Ohtsuki;Junko Inagaki;Kentaro Ikemura;Shintaro kodama;Satoshi Hirohata
• 通讯作者: Satoshi Hirohata

Isolation and functional screening of osteoarthritis related miRNA

骨关节炎相关miRNA的分离及功能筛选

• 发表时间: 2019
• 作者: Miho Tachiki;Omer faruk Hatipogl;Takashi Ohtsuki;Junko Inagaki;Takuto Nishimura;Yuka Ooka;Kentaro Ikemura;Chang Lu;Yan Wanyu;Satoshi Hirohata
• 通讯作者: Satoshi Hirohata

Critical role of ADAMTS1 in the development of ventral wall

ADAMTS1 在腹壁发育中的关键作用

• 发表时间: 2019
• 作者: Chang Lu;Omer Faruk Hatipoglu;Takuto Nishimura;Miho Tachiki;Junko Inagaki;Takashi Ohtsuki;Liankun Sun;Satoshi Hirohata
• 通讯作者: Satoshi Hirohata