Nanoprobe investigating pH-dependent polarized tumor-associated macrophages at single-cell level

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pH依存性のTAM分極化は、抗腫瘍免疫療法にとって魅力的であるが、その極めて高い可塑性と不均一性のために、単一細胞レベルでの可塑的で不均一なpH依存性のTAM分極化のメカニズムを、ラベルフリー、非接触、リアルタイムで探索するための新しい高解像でpH感受性の表現型決定のためのアプローチを開発することが必要である。新しい走査イオン伝導顕微鏡ソフトウェアは、走査イオン伝導顕微鏡 pH ナノプローブで検出する機械的特性を1つの走査イオン伝導顕微鏡フィードバック制御マルチパラメトリック走査ナノプローブ 腫瘍関連マクロファージ表現型プラットフォームに統合するために開発された。本研究ではpHe依存性のTAM表現型可塑性を調べるために、制御された環境を提供する　in vitro　の　TAM　モデルを使用する。M1　または　M2　マクロファージ細胞モデルとして、十分に特徴づけられた　THP-1　単球細胞株を使用する。そして、この分極化した　THP-1　マクロファージを、既報のトランスウェル共培養システムで乳がんMCF7細胞と共培養する。このようなトランスウェル共培養は、分極化した　THP-1　マクロファージをMCF7細胞との直接的な接触から分離するが、MCF7　細胞由来の酸性化腫瘍微小環境が　THP1-TAM　の　pH　依存性分極化を刺激することを　in vitroで可能にする。M1 TAM　マーカー（HLA-DR、iNOS、pSTAT1）または　M2 TAM　マーカー（CD206、CD204、CD163）の表面での発現を分析し、これらTHP1-TAM細胞の表現型を確認する。