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デノボ・再利用経路に着目した時空間特異的な麻痺性貝毒生合成制御メカニズムの解明

阐明麻痹性贝类毒素生物合成的时空特异性控制机制，重点关注从头和再利用途径

基本信息

批准号：
22K05327
负责人：
長由扶子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

１．STX生合成におけるデノボ経路及び再利用経路の時空間特異性の解析：代謝回転研究用に最近開発したin vivo標識法を用いて、Alexandrium catenella（Group I)有毒株の15Nの取り込み挙動を観察した。15Nの取り込みプロファイルの変動からデノボ生合成と再利用生合成それぞれの二項分布成分の生産速度を算出し動的に解析する手法を確立した。２． STX生合成遺伝子をターゲットとするmiRNAの探索：データベース探索したところAlexandrium属の渦鞭毛藻のmiRNAseqデータがすでに登録されていた。有毒無毒で差のあった生合成遺伝子sxtA4の3'非翻訳領域と相同性のある配列を検索したところ複数の配列がヒットした。いずれもmiRNAより長い長鎖ノンコーディングRNAと推測された。それらの配列を基に設計したプライマーを用いてA. catenella（Group I)有毒株のゲノムから重複PCRで増幅産物を得たため、同様な配列の存在が示唆された。３．代謝阻害剤ニゲリシン添加系の変動解析：アミノ酸輸送活性阻害剤であるニゲリシンを添加した系のSxtA及びRbcLII発現量変動解析とin vivo標識データの動的解析により、ニゲリシンはSTX生合成のデノボ、再利用両生合成を抑制し、代謝を亢進させていると考察した。炭酸固定酵素ルビスコは植物の細胞で最も多くの窒素が分配されるタンパク質であり、その発現が上昇すると窒素含有二次代謝物であるSTX類縁体の生合成が低下し、代謝が亢進することが実験的に初めて明らかとなった。またニゲリシンが前駆体アミノ酸だけでなく、一部の生合成中間体の輸送も抑制しているのではないかという仮説を提唱できた。遺伝子工学的な手法が適用できない本生物にとって代謝阻害剤とin vivo標識、免疫染色を組み合わせた解析が有用であることがわかった。

Analysis of the time and space characteristics of 1.STX synthesis and reuse cycles: the recently opened in vivo labeling method was used in the study, and Alexandrium catenella (Group I) virulent strain 15N was used to detect the activity of the drug. In 15N, the analytical method of the movement is determined by using the growth rate of the two distribution components of the synthetic enzyme, which is used to determine the accuracy of the movement. 2. STX synthesizes the seeds of the genus Alexandrium, the genus Alexandrium, the dinoflagellates, the miRNAseq species, the flagellates, the crabs, the chlamydae, the chlamydomonas, the chlamydomonas. Toxic, non-toxic, synthetic, toxic, non-toxic, non-toxic, toxic, non-toxic, Thank you, miRNA, please. Please tell me that the RNA is going to push you around. Catenella (Group I) virulent strains were used to determine the weight of PCR products, and the presence of the same type of equipment in the same column indicated that it was not safe. 3. On behalf of the control system, add the system analysis: use the acid to prevent the activity of the system. Add the SxtA and RbcLII measurement to the analysis of the in vivo profile, synthesize the STX, synthesize the product, use the synthetic inhibitor, and enhance the performance test. Carbonic acid immobilized enzyme, asphyxiant, asphyxia, asphyxia, asphy In front of the film, there was a song in front of the body, and a movie in the process of synthesis, which was sent to inhibit the song. The technique of computer engineering is used to block the identification of in vivo in this biological system. Immunostaining is used to analyze the useful information.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

電位依存性ナトリウムチャネルに対するサキシトキシン合成誘導体の感受性評価

石房蛤毒素合成衍生物对电压门控钠通道的敏感性评估

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
工藤雄大,此木敬一;山下まり;山下まり,土肥裕花,岩崎浩太郎,佐々木理,川島悠岐,島田紀子,工藤雄大,長由扶子,此木敬一,佐々木誠;小林巧,吉尾柊太郎,千葉修,濡木絢斗,髙栁優夏,石塚颯,工藤雄大,長由扶子,山下まり,長澤和夫,此木敬一
通讯作者：
小林巧,吉尾柊太郎,千葉修,濡木絢斗,髙栁優夏,石塚颯,工藤雄大,長由扶子,山下まり,長澤和夫,此木敬一

多価不飽和脂肪酸による電位依存性ナトリウムチャネルの阻害機構

多不饱和脂肪酸对电压门控钠通道的抑制机制

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
○Shutaro Yoshio;Osamu Chiba;Noriko Shimada;Yuta Kudo;Yuko Cho ;Mari Yotsu-Yamashita Keiichi Konoki
通讯作者：
Mari Yotsu-Yamashita Keiichi Konoki

アミノ酸輸送体阻害剤が渦鞭毛藻 STX 生合成に及ぼす影響の動的解析

氨基酸转运蛋白抑制剂对甲藻STX生物合成影响的动态分析