Comprehensive analysis of bovine endometrial miRNAs and its function in the embryo elongation.

牛子宫内膜miRNA的综合分析及其在胚胎伸长中的作用

• 批准号: 22K05970
• 负责人: 山内 伸彦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05970/
• 关键词: miRNA; 子宮内膜; ウシ; 胚伸長; 培養細胞

本研究では、近年細胞間の情報伝達において重要性が指摘されているmiRNAに着目し、子宮内miRNAのウシ胚伸長に対する機能的役割を明らかにすることを目標とする。令和4年度はRNAseq解析によりウシ子宮内膜miRNAの網羅的解析を行った。その結果、卵胞期、黄体期および着床期でそれぞれ374個、398個および728個もmiRNAが確認された。GO機能エンリッチメント解析の結果、それぞれのステージで発現が上昇したmiRNAのターゲット遺伝子の多くは細胞構成成分、中でも細胞質、細胞膜、膜貫通型タンパク質の機能に関与するものであった。また、胚伸長に関与するmiRNAを同定するため、黄体期と着床期で発現するmiRNAの比較を行った。その結果、変化倍率が1.5倍以上かつ片方のステージで1000リードを越えるmiRNAは合計35個確認された。その内、黄体期で発現が高いmiRNAは既知が14個、着床期で高いものは既知が19個、新規が2個であった。これらのmiRNAは胚性因子によって制御され、胚伸長に関与している可能性が示唆された。さらに、子宮内に存在するエクソソーム（Exo）が胚に与える影響を調べるため、ウシ胚由来の培養栄養膜細胞(BT細胞)を用いてその影響を解析した。ウシ子宮灌流によって回収したExoを蛍光標識してBT細胞の培地中に添加したところ、ExoがBT細胞に取り込まれていることが確認された。また、Exo無添加区では小胞が消失していたのに対し、Exo添加区では小胞構造が維持されていた。qPCRの結果、Exo添加区においてPCNAおよびCCND1遺伝子の発現量が有意高い値を示した（P<0.05）。これらの結果から、子宮内Exoが胚の生存性および遺伝子発現に対して影響を与える可能性が示唆された。

In this study, in recent years, the importance of intercellular communication has reached a high level. In this study, the importance of intercellular communication has reached a high level in recent years. In this study, in this study, in recent years, there has been a great deal of importance in this study. In this study, in recent years, there has been a great deal of importance in this study. In this study, in recent years, there has been a great deal of importance in this study. In this study, in recent years, the importance of intercellular communication has reached a high level in recent years. Ling and the 4-year RNAseq resolution sub-network analysis of the intimal miRNA network. The results of the experiment, oocyte phase and luteal phase were confirmed in 374,398 cases and 728 miRNA samples in the implantation period. GO was used to analyze the results, the results were analyzed, and the results were analyzed. The results showed that the components of miRNA cells, cells, membranes, membranes and membranes were detected. The results of miRNA during implantation in luteal phase were higher than that in miRNA phase. The results and magnification ratio are more than 1.5 times. The total number of confirmed miRNA accounts is 35 in total. In all, there are more than two hundred and fifty percent of the total number of confirmed miRNA certificates. There were 14 known high-altitude miRNA during intra-and luteal phase, 19 during implantation, and 2 in the new specification. The possibility of miRNA control, embryo elongation and embryo growth has been indicated by different embryogenic factors. The embryo (Exo) and the origin of the embryo (BT) were analyzed by the method of cell culture and analysis. In the culture ground, add Exo cells and Exo BT cells to confirm the location of the cell. The small cells in the added areas of Exo and Exo disappear and the cells in the added areas of Exo are made to maintain the concentration of cells. The results of qPCR results showed that the concentration of Exo in the addition area of Exo was significantly higher than that of CCND1 (P < 0.01). The results showed that there were significant differences between the two groups in the results of PUBG. The results showed that the Exo embryo survival rate in the child was significantly higher than that in the control group (P < 0.05).

项目成果

ウシ栄養膜細胞のIFNt発現制御因子の検索

牛滋养层细胞IFNt表达调控因子的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Yutaka Masuda;諌早怜士，齋藤悠々，竹之内学睦，林武司，山内伸彦;小川紗良，谷口楓果，齋藤悠々，西野大地，木崎景一郎，高橋透，山内伸彦
• 通讯作者: 小川紗良，谷口楓果，齋藤悠々，西野大地，木崎景一郎，高橋透，山内伸彦

ウシ栄養膜細胞に対する子宮内エクソソームの影響

子宫内外泌体对牛滋养层细胞的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: Takahashi Hiro;Hayashi Noriya;Hiragori Yuta;Sasaki Shun;Motomura Taichiro;Yamashita Yui;Naito Satoshi;Takahashi Anna;Fuse Kazuyuki;Satou Kenji;Endo Toshinori;Kojima Shoko;Onouchi Hitoshi;斎藤悠々
• 通讯作者: 斎藤悠々

ウシ子宮内膜組織におけるmiRNAの網羅的解析

牛子宫内膜组织中miRNA的综合分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 由里本博也;阪井康能;諌早怜士
• 通讯作者: 諌早怜士