Development of a simple, inexpensive, and highly sensitive on-site diagnosis system for African swine fever

开发简单、廉价、高灵敏度的非洲猪瘟现场诊断系统

• 批准号: 22K05950
• 负责人: 山崎 安子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05950/
• 关键词: アフリカ豚熱; オンサイト診断; ASF; POCT

本研究では、研究代表者らが独自に開発した牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)診断システムを初めてアフリカ豚熱ウイルス(ASF)に応用し、感染個体のオンサイト診断や野生イボイノシシ・水を含む環境サンプル中からの高感度・迅速ウイルス検出を実現することにより、ASF発生国での早期封じ込めを可能とし、世界の食肉の安定供給へ貢献することを目的としている。2022年度はベトナムにおいて、ベトナム国立農業大学の協力のもと、ASFの迅速かつ高感度なポイントオブケア検査（POCT）を開発した。このPOCTは、豚の全血を用いて、DNA抽出開始から最終判定まで最大50分で完了する。高価な設備や機器は不要であり、電池式の卓上遠心機およびヒートブロックを使用するため極めて低コストで実施できる。豚全血89検体について評価したところ、従来のリアルタイムPCR法と比較して、検出感度は10倍低下したものの、診断的感度は100％（56/56）、診断的特異度は100％（33/33）と同等であった。2023年度は、開発したPOCTをさらに応用し、ウイルス濃縮という観点からより向上した検出診断法を開発する。その上で、水などの環境サンプルからASFの検出が可能であるかを東南アジアにて調査する予定である。さらに2024年度については、アジアで流行しているASFだけでなくASF常在国であるアフリカのタンザニアのASFについても、同様に開発したPOCTを活用できるかの実証実験を行う計画である。

This study was conducted on behalf of the authors of the study who independently developed the early detection of infectious disease (BLV) in the diagnosis of ASF and its use in infected individuals, as well as in the diagnosis of wild-type disease (ASF), water-containing environmental disease, high sensitivity, rapid detection of ASF and the possibility of early detection of ASF in the developing countries. The world's stable supply of meat contributes to this goal. In 2022, the National Agricultural University's cooperation and ASF's rapid development of high-sensitivity test (POCT) were launched. This POCT is used for whole blood extraction, DNA extraction starts, and final judgment is completed with a maximum of 50 points. High voltage equipment is not required, battery type remote control equipment is not required, and battery type remote control equipment is not required. The sensitivity of PCR was 10-fold lower than that of PCR. The diagnostic sensitivity was 100%(56/56) and the diagnostic specificity was 100%(33/33). In 2023, POCT was developed for the purpose of diagnosis and evaluation. The environmental conditions of the upper and lower reaches of the Yangtze River may be determined by investigation. In 2024, ASF was popular and popular, and ASF was often used in China. POCT was developed and implemented in China.

项目成果

簡易迅速なDNA抽出とLAMP検出を組み合わせた、アフリカ豚熱の高感度なポイントオブケア検査の開発：自然感染豚の全血検体を用いたベトナムでの評価

结合简单快速的 DNA 提取和 LAMP 检测，开发一种高度灵敏的非洲猪瘟现场检测：在越南使用自然感染猪的全血样本进行评估

• 发表时间: 2023
• 作者: Wataru Yamazaki;Mai Thi Ngan;Huynh Thi My Le、Vu Ngoc Dang;Trinh Thi Bich Ngoc、Le Van Phan;Nguyen Thi Hoa;Truong;Quang Lam;Nguyen Thi Lan;Yasuko Yamazaki;Kosuke Notsu;Satoshi Sekiguchi
• 通讯作者: Satoshi Sekiguchi

アフリカ豚熱の高感度なフィールド検査法の開発：豚全血を用いたベトナムでの評価

非洲猪瘟高灵敏度现场检测方法的开发：在越南使用猪全血进行评估

Development of a point-of-care test for ASF

开发 ASF 即时检测

Development of a highly sensitive point-of-care test for African swine fever that combines EZ-Fast DNA extraction with LAMP detection: Evaluation using naturally infected swine whole blood samples from Vietnam.

• DOI: 10.1002/vms3.1124
• 发表时间: 2023-05
• 期刊: VETERINARY MEDICINE AND SCIENCE
• 影响因子: 1.7
• 作者: Ngan, Mai Thi;Thi My Le, Huynh;Ngoc Dang, Vu;Thi Bich Ngoc, Trinh;Phan, Le Van;Thi Hoa, Nguyen;Quang Lam, Truong;Thi Lan, Nguyen;Notsu, Kosuke;Sekiguchi, Satoshi;Yamazaki, Yasuko;Yamazaki, Wataru
• 通讯作者: Yamazaki, Wataru

ベトナム国立農業大学(ベトナム)

越南国立农业大学（越南）