Elucidation of biological functions of the NCBP3 RNA-binding protein using a novel mutant mouse strain

使用新型突变小鼠品系阐明 NCBP3 RNA 结合蛋白的生物学功能

基本信息

批准号：
22K06065
负责人：
森政之
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

Nuclear cap-binding protein subunit 3（Ncbp3）遺伝子に変異をもつマウスを用いて、RNA結合タンパク質であるNCBP3の生体機能の解明を進めた。Ncbp3変異アレルヘテロ雄マウスから採取した精子と野生型雌マウスから採取した卵と受精させ、その受精卵が二細胞になった時点で偽妊娠マウスの卵管に移植して産仔を得た。その結果、生まれてきたマウスにおける野生型アレルホモ型個体と変異アレルヘテロ型個体の比率は16：20と1：1に近似していたことから、少なくとも変異アレルヘテロマウスも正常に個体発生することが確認された。一方、変異アレルヘテロ雌雄マウスを自然交配させて得た７腹からは計37匹のマウスが生まれた。平均１腹産仔数は5.3匹と野生型マウスと比較して有意に少ないことが分かった。37匹のマウスにおける野生型アレルホモ型個体とヘテロ型個体と変異アレルホモ型個体との比率は16：17：4であり、変異アレルホモ型個体の割合が有意に低かった。この結果より、変異アレルホモマウスは発生期に高頻度で死亡していることが示唆された。また、変異アレルホモ型個体のうち１匹は水頭症を発症しており、５週齢で死亡した。6から11ヶ月齢のNcbp3変異ヘテロマウスの病理学的解析を行なった。その結果、腎臓と肝臓において血管周囲の細胞の異常増殖や好酸球の浸潤が、心臓では心筋細胞内の空胞形成や核の位置異常、皮膚では皮下脂肪の薄化が認められた。しかしながら、その重篤度には個体間、および同一個体の中でも部位によってかなりの違いがあることが判明した。Ncbp3変異ヘテロマウスの肝臓における遺伝子転写産物の種類とその発現レベルの変化をRNA-Seq解析によって調査した。その結果、野生型マウスと比較して特徴的な違いは無いことが分かった。

在核帽结合蛋白亚基3（NCBP3）基因中携带突变的小鼠用于阐明RNA结合蛋白NCBP3的生物学功能。从雄性小鼠突变的抗痛剂和从野生型雌性小鼠收集的卵中收集的精子被施肥，当受精卵变成两个细胞时，将卵移植到假孕剂小鼠的输卵管中，以获得小牛出生。结果，野生型等位基因同型个体与出生小鼠中突变等位基因异型个体的比率近似为16:20和1：1，并且已经证实至少是突变等位基因异型型小鼠也正常发展。同时，总共37只小鼠是从自然交配突变蛋白 - 原型男性小鼠获得的七个腹部中诞生的。每窝的平均垃圾数为5.3，明显低于野生型小鼠。野生型过敏同型个体与37只小鼠中的异型个体和突变过敏同型个体的比率为16：17：4，突变过敏同源型个体的比例显着较低。这些结果表明，突变等位基因同性恋小鼠以高频的新生阶段死亡。此外，其中一个突变过敏的同型个体发展出脑积水，并在5周龄时去世。 NCBP3突变异质症的病理分析在6至11个月之间进行。结果，在肾脏和肝脏中观察到了血管周围细胞的异常增殖和嗜酸性粒细胞的浸润，心脏中心肌细胞内的液泡形成和心脏中核异常，以及皮肤皮下脂肪的稀释。但是，发现个人和同一个人之间的严重程度有显着差异。通过RNA-Seq分析研究了NCBP3突变体杂型小鼠肝脏中基因转录类型和表达水平的变化。结果表明，与野生型小鼠相比，没有明显的差异。