全能性幹細胞におけるレトロトランスポゾンMERVLの核内RNA機能解析

全能干细胞中逆转录转座子MERVL的核RNA功能分析

基本信息

  • 批准号:
    22K06091
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

本研究の目的は、マウスES細胞の培養中にごく稀に出現する2細胞期胚と遺伝子発現パターンが類似した2細胞期様細胞(2CLC)のエピジェネティックな特徴を解析し、多能性細胞と全能性細胞のリプログラミング機構の詳細を明らかにすることである。マウス2細胞期胚では、胚性遺伝子活性化(ZGA)に伴い一過的にMERVLと呼ばれるレトロトランスポゾンが活性化される。申請者らは、これまでにアンチセンスオリゴ(ASO)を用いた機能阻害実験により、MERVLが全能性から多能性への遺伝子発現プログラムの移行に関与し、マウス初期胚発生の進行に必須の役割を担うことを明らかにした。2CLCでもMERVLが発現することから、2CLCを全能性細胞のin vivoモデルとしてMERVLの機能解析を進めている。本研究では、多能性細胞と全能性細胞の間のエピジェネティックな転換機構を明らかにするために、ES細胞集団から、ES細胞、2CLC、ES細胞から2CLCへの移行段階にある中間細胞の3つの集団を分取するMagnetic-activated cell sorting(MACS)システムを確立した。分取したそれぞれの細胞をマウス8細胞期胚にインジェクションし、胚盤胞でのキメラ形成能を調べた結果、中間細胞と2CLCが内部細胞塊と栄養外胚葉に寄与する全能性を有することが示された。中間細胞には、MERVLを高発現した細胞が含まれていないことから、全能性の獲得はMERVLの活性化以前に起こることが示唆された。MERVLは、2CLCで発現することで、全能性から多能性への遺伝子発現プログラムの転換を促進していると考えられる。従来、全能性とされてきた2CLCは、多能性への移行過程の細胞であり、全能性の獲得はMERVLが活性化される以前の段階で完了している可能性がある。
The purpose of this study is to analyze the characteristics of embryonic development in 2-cell stage cells (2CLC) and to clarify the mechanism of pluripotent cells in culture. 2. Embryonic and embryogenic gene activation (ZGA) is accompanied by MERVL activation. However, the applicant has made it clear that while the functional barriers of using the AntanossOli (ASO) are practical, MERVL is both versatile and multi-functional in terms of the migration of the genetic discovery platform, and the necessary labor required for the initial development of the mouse. 2CLC is a totipotent cell in vivo, and the functional analysis of MERVL is progressing. In this study, we established the mechanism of magneto-activated cell sorting (MACS) in ES cell population, ES cell population, 2CLC, ES cell population and the transition stage between pluripotent and totipotent cells. The results of cell differentiation and differentiation showed that the cells in the 8-cell embryo stage, blastoderm cell formation, intermediate cells, and 2CLC had the totipotency to support the ectoderm. The intermediate cells, MERVL high expression cells, contain the same, totipotency and activation of MERVL before the same. MERVL promotes the development of 2CLC, omnipotent, pluripotent, and genetically-transmitted proteins. 2CLC has the possibility of completing the previous stages of MERVL activation.

项目成果

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专利数量(0)
Transient MERVL expression regulates the totipotent 2C-like state in murine embryonic stem cells
瞬时 MERVL 表达调节小鼠胚胎干细胞的全能 2C 样状态
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Abe K;Kabe Y;Uchiyama S;Iwasaki YW;Ishizu H;Uwamino Y;Takenouchi T;Uno S;Ishii M;Maruno T;Noda M;Murata M;Hasegawa N;Saya H;Kitagawa Y;Fukunaga K;Amagai M;Siomi H;Suematsu M;Kosaki K;Keio Donner Project.;Hirotsugu Ishizu
  • 通讯作者:
    Hirotsugu Ishizu
Siomi Lab Keio University
西米实验室 庆应义塾大学
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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    塩見 美喜子
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  • 通讯作者:
    塩見 美喜子

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