ヒト抗肥満創薬を目指した多面的アプローチによる標的分子の探索と機能解析

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内臓周囲に脂肪組織が沈着する内臓型肥満は動脈硬化のリスクを高めるが、皮下脂肪組織が蓄積する皮下型肥満は動脈硬化のリスクを軽減すると言われている。この病態の差異に関わる分子基盤を明らかにするため、ヒトの内臓脂肪細胞と皮下脂肪細胞から抽出したtotal RNAを用いてマイクロアレイおよびqRT-PCRによる発現比較を行った。皮下脂肪細胞で内臓脂肪細胞よりも有意に高発現する遺伝子としてCSTA、OXT、WISP2、NNAT、TBX15など14種、内臓脂肪細胞で皮下脂肪細胞よりうも有意に高発現する遺伝子としてADRB1、SORL1、UCP2の３種を同定した。このうちOXT、WISP2、NNAT、TBX15の発現アデノウイルスを構築とCSTAの組換えタンパク質の精製を行った。OXT、WISP2の過剰発現させたヒト皮下脂肪細胞株SGBS細胞および組換えCSTAを作用させたSGBS細胞を脂肪分化誘導し、複数の脂肪細胞マーカー遺伝子の発現量を対照群と比較したが、これらに差は認められなかった。脂肪分化に関わる分子機序は、マウスの細胞株3T3-L1やマウスの前駆脂肪細胞を用いた研究で明らかになったものが多いが、ヒトではマウスと異なる分子機序が存在することも報告されている。ヒト特異的脂肪分化に関連する分子を同定するため、SGBS細胞と3T3-L1細胞の脂肪分化過程に発現が上昇する遺伝子の同定とその比較をマイクロアレイおよびqRT-PCRを用いて行った。ヒト特異的に脂肪分化過程で発現誘導される遺伝子として、現在までに20種類以上の候補遺伝子を同定した。そのうち、GALNT15、ACSF2、MT1Xの発現抑制系と過剰発現系を構築し、GALNT15とMT1Xの発現抑制はSGBS細胞の脂肪分化を抑制することを見出した。