Developmental neural circuit formation based on the competition between excitatory and inhibitory inputs in the cerebellum

【研究の概要】小脳皮質唯一の出力細胞であるプルキンエ細胞は苔状線維－平行線維系と登上線維による２種類の興奮性入力と、介在神経細胞による抑制性入力を受けている。小脳の神経回路形成・維持には興奮性入力間の競合が重要であることが明らかにされてきたが、興奮性入力と抑制性入力の競合がどのように関与しているかについては不明な点が多い。申請者はこれまでの予備実験の結果から、細胞内の局所カルシウム放出に関わる分子、Car8の分子欠損マウスにおいて、興奮・抑制入力競合の不均衡を示唆する解剖学的所見を得ている。本研究は小脳の神経回路発達形成過程と維持は興奮・抑制入力間でのシナプス競合によって成り立っているという仮説をたて、この実験的証明を行う。【令和４年度の研究成果】申請者はアデノ随伴ウィルス（AAV）を用いたStxbp1遺伝子欠損誘導に成功しており、今後は小脳における興奮―抑制不均衡モデルとして介在ニューロン特異的消失マウスの作成と解析を行う予定である。同様に、興奮―抑制不均衡が観察されているCar8分子欠損マウスでは、興奮性終末が脱落しているフリースパインにおいてシナプス接着分子の発現が減少しているという所見が得られた。最後にAAVを用いたCar8発現回復を行うことで、興奮性シナプスの回復と抑制性シナプス形成亢進が抑制される傾向が見られ、神経回路の興奮―抑制均衡維持がCar8によって制御されているという重要な所見を得た。

【研究の概要】小脳皮質唯一の出力細胞であるプルキンエ細胞は苔状線維－平行線維系と登上線維による２種類の興奮性入力と、介在神経細胞による抑制性入力を受けている。小脳の神経回路形成・維持には興奮性入力間の競合が重要であることが明らかにされてきたが、興奮性入力と抑制性入力の競合がどのように関与しているかについては不明な点が多い。申請者はこれまでの予備実験の結果から、細胞内の局所カルシウム放出に関わる分子、Car8の分子欠損マウスにおいて、興奮・抑制入力競合の不均衡を示唆する解剖学的所見を得ている。本研究は小脳の神経回路発達形成過程と維持は興奮・抑制入力間でのシナプス競合によって成り立っているという仮説をたて、この実験的証明を行う。【令和４年度の研究成果】申請者はアデノ随伴ウィルス（AAV）を用いたStxbp1遺伝子欠損誘導に成功しており、今後は小脳における興奮―抑制不均衡モデルとして介在ニューロン特異的消失マウスの作成と解析を行う予定である。同様に、興奮―抑制不均衡が観察されているCar8分子欠損マウスでは、興奮性終末が脱落しているフリースパインにおいてシナプス接着分子の発現が減少しているという所見が得られた。最後にAAVを用いたCar8発現回復を行うことで、興奮性シナプスの回復と抑制性シナプス形成亢進が抑制される傾向が見られ、神経回路の興奮―抑制均衡維持がCar8によって制御されているという重要な所見を得た。