新規核酸アナログによるRNAウイルス感染細胞内ATP合成・局在変化制御機構の解明

使用新型核酸类似物阐明RNA病毒感染细胞中ATP合成和定位变化的控制机制

• 批准号: 22K07092
• 负责人: 滝沢 直己
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Microbial Chemistry Research Foundation
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07092/
• 关键词: インフルエンザウイルス; 抗RNAウイルス薬; 天然物; 抗ウイルス薬; 核酸アナログ

インフルエンザウイルス増殖抑制活性を持つ化合物、methyl-thio-formycin（SMeFM）は宿主側に作用する化合物であると考えられるため、インフルエンザウイルス以外のRNAウイルス増殖抑制活性について評価を行った。この結果、SMeFMは感染系、レプリコン細胞系の両方で抗SARS-CoV-2活性を持つことを明らかとした。SARS-CoV-2の増殖を抑制する濃度で細胞死は確認されなかったことから、ウイルス増殖を特異的に阻害していると考えられる。他のRNAウイルスにおけるSMeFMの作用についても現在検討している。SMeFMはATP合成に関わる経路を阻害する可能性が高いことから、インフルエンザウイルス感染細胞内およびSMeFM処理細胞内におけるATPの量、局在について検討を行うために、ATPセンサーであるMaLionGを恒常発現するMDCK細胞であるMDCK-MaLionG細胞の樹立を行った。また、SMeFMについてはマウス体内での安定性が低いことが動物実験を行う上での支障となっていたことから、SMeFM代謝経路の解明を行った。この結果、SMeFMを基質としてformycin Bに代謝する活性を持つ酵素を同定した。この結果を元に、SMeFM誘導体の代謝実験を行ったところ、酵素に認識されるSMeFM上の部位について特定し、SMeFMの抗インフルエンザウイルス活性をほぼ維持した状態でマウスで代謝安定となるSMeFM誘導体を同定した。

A compound with host-side effects, methyl-thio-formycin (SMeFM), and a compound with RNA growth-inhibiting activity other than methyl-thio-formycin. As a result, the anti-SARS-CoV-2 activity of SMeFM infected lines and cell lines was maintained. SARS-CoV-2 inhibits proliferation at concentrations that confirm cell death and inhibit proliferation specifically. He has RNA in his cell. SMeFM's function is to detect the presence of RNA in the cell. SMeFM has a high probability of inhibiting ATP synthesis in the ATP pathway, affecting intracellular ATP levels, and SMeFM treatment in intracellular ATP levels. ATP levels in the ATP pathway are constantly present in MDCK cells and MDCK-MaLionG cells are established. The stability of SMeFM in vivo is low, and the stability of SMeFM metabolic pathway is clear. As a result, SMeFM matrix and formycin B activity are constant. As a result, the metabolic stability of SMeFM inducer was determined by enzyme recognition, and the metabolic stability of SMeFM inducer was determined by enzyme recognition.

项目成果

微生物化学研究所

微生物化学实验室