T前駆細胞由来樹状細胞は制御性T細胞の生成を介し自己免疫寛容の構築に寄与するか

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胸腺はT細胞が分化成熟する場である。胸腺組織はT前駆細胞だけでなく、胸腺上皮細胞（TEC）や樹状細胞（DC）等も存在し、それらはT細胞の分化成熟に関与する。T前駆細胞は、胸腺内で正の選択（自己細胞に適度に反応できる細胞が選ばれる）と負の選択（自己細胞に過剰に反応する細胞が死滅する）を経て自己に寛容で適切に異物に反応しうるT細胞のみが選択され末梢に移出される。胸腺における免疫寛容構築の機序として、T細胞の負の選択、制御性T細胞の生成が挙げられる。申請者らはこれまでにT前駆細胞由来樹状細胞（ptDC）は負の選択に寄与していることを明らかにした。本研究ではptDCが制御性T細胞の生成を誘導し、免疫寛容構築に寄与するかを解析したい。申請者は、ptDCは独特な分化経路を経て生成することから、cirDCとは異なり何らかの特有の機能・存在意義を有しているのではないかと着想した。ptDCの特徴を明らかにする目的でsingle cell RNA sequence解析を実施した。ptDCを循環血に由来するDC（cirDC）同定するため、以下のマウスモデルを考案・作製した。B6マウス（CD45.2を発現、H-2b）をレシピエントとし、hCD3e Tgマウス(T前駆細胞を欠損、CD45.2を発現、H-2k)とCD45.1-B6マウス（CD45.1を発現するコンジェニックマウス、H-2b。骨髄移植の影響を考慮するため、レシピエントとは異なるマーカーをもつB6を利用）の骨髄を混合して移植した。尚、この三者の血液細胞は、CD45.1/CD45.2、H-2b/H-2kの発現で区別可能である。骨髄移植後、定常状態となったところで、レシピエント胸腺から胸腺内DCを回収し、Single cell RNA sequence解析を実施した。この解析により、ptDCを同定し、現在ptDCの生物学的特徴を解析している。