T前駆細胞由来樹状細胞は制御性T細胞の生成を介し自己免疫寛容の構築に寄与するか

T 祖细胞衍生的树突状细胞是否通过调节性 T 细胞的生成有助于建立自身免疫耐受？

• 批准号: 22K07113
• 负责人: 和田 はるか
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07113/
• 关键词: T前駆細胞; 樹状細胞; 制御性T細胞; T細胞選択; T細胞分化

胸腺はT細胞が分化成熟する場である。胸腺組織はT前駆細胞だけでなく、胸腺上皮細胞（TEC）や樹状細胞（DC）等も存在し、それらはT細胞の分化成熟に関与する。T前駆細胞は、胸腺内で正の選択（自己細胞に適度に反応できる細胞が選ばれる）と負の選択（自己細胞に過剰に反応する細胞が死滅する）を経て自己に寛容で適切に異物に反応しうるT細胞のみが選択され末梢に移出される。胸腺における免疫寛容構築の機序として、T細胞の負の選択、制御性T細胞の生成が挙げられる。申請者らはこれまでにT前駆細胞由来樹状細胞（ptDC）は負の選択に寄与していることを明らかにした。本研究ではptDCが制御性T細胞の生成を誘導し、免疫寛容構築に寄与するかを解析したい。申請者は、ptDCは独特な分化経路を経て生成することから、cirDCとは異なり何らかの特有の機能・存在意義を有しているのではないかと着想した。ptDCの特徴を明らかにする目的でsingle cell RNA sequence解析を実施した。ptDCを循環血に由来するDC（cirDC）同定するため、以下のマウスモデルを考案・作製した。B6マウス（CD45.2を発現、H-2b）をレシピエントとし、hCD3e Tgマウス(T前駆細胞を欠損、CD45.2を発現、H-2k)とCD45.1-B6マウス（CD45.1を発現するコンジェニックマウス、H-2b。骨髄移植の影響を考慮するため、レシピエントとは異なるマーカーをもつB6を利用）の骨髄を混合して移植した。尚、この三者の血液細胞は、CD45.1/CD45.2、H-2b/H-2kの発現で区別可能である。骨髄移植後、定常状態となったところで、レシピエント胸腺から胸腺内DCを回収し、Single cell RNA sequence解析を実施した。この解析により、ptDCを同定し、現在ptDCの生物学的特徴を解析している。

Thymic T cell differentiation and maturation. Thymic tissue contains T lymphocytes, thymic epithelial cells (TEC) and dendritic cells (DC), which are related to T cell differentiation and maturation. T cells in the thymus have positive and negative selection (cell selection in the right direction) and negative selection (cell death in the right direction). T cells in the right direction have positive and negative selection (cell selection in the right direction). The mechanism of immune capacity construction in thymus gland, negative selection of T cells and production of regulatory T cells are discussed. The applicant has a negative selection of dendritic cells (ptDC) and a negative selection of dendritic cells. In this study, we analyzed the induction of ptDC regulatory T cells and the construction of immune capacity. The applicant has the unique function of creating a different cirDC. ptDC characterization was performed for the purpose of single cell RNA sequence analysis. The origin of ptDC circulating blood (cirDC) is determined by the following factors: B6-B6 (CD45.2, H-2b), hCD3e Tg, CD45.1-B6 (CD45.1, H-2b), CD45.2, H-2k. The effect of bone grafting should be considered. CD45.1/CD45.2 and H-2b/H-2k may be distinguished from each other. After bone transplantation, steady state, thymic DC recovery and Single cell RNA sequence analysis were performed. This analysis, ptDC identification, and analysis of the biological characteristics of ptDC.