Metabolomics analysis of plasma and exosomes for frailty biomarkers

血浆和外泌体的衰弱生物标志物代谢组学分析

• 批准号: 22K07470
• 负责人: 横山 世理奈
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07470/
• 关键词: フレイル; バイオマーカー; メタボロミクス解析; エクソソーム

大阪大学医学部付属病院　老年・高血圧内科の65歳以上の男女で、入院中の患者に絞り、本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られた者より、申請書に記載したエントリー基準を満たす患者より血液検体を採取している。除外基準は①本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られなかった者、②寝たきりの者、③腎機能障害（血清クレアチニン≧2.0mg/dL）、肝障害（AST及びALT≧50U/L）を認める者、⑤悪性腫瘍を有する者、⑥余命が1ヵ月以内と推定できる者と設定している。血液検体は一般採血（血算、生化学）以外は、メタボロミクス解析、エクソソームの解析に供するためのものとして処理し、-80℃に保存している。検体の採取にあたっては、12時間以上絶食後の朝に採血し、EDTAの入った採血管を用いて、血漿を遠心分離し、内部標準物質入りの-40℃メタノールに加え、攪拌し、その後、限外濾過フィルターへ移し、遠心し、真空蒸着を行った。検体は-80℃保存している。血漿からのエクソソームの抽出に際しては、qEV35（メイワフォーシス）を用いたsize exclusion chromatographyにより行った。また、エクソソームの一部はフレイルの関連する臓器特異的表面マーカー（神経であればL1CAM、筋肉であればα-sarcoglycan）による分離に供するために懸濁液にて-80℃で保存している。研究対象患者のフレイル指標や臨床指標は厳重なセキュリティー・ポリシーの下、管理している。

Osaka university pay old, high blood 圧 belong to hospital internal medicine department more than 65 showed の の で men and women, に ground り の patients in hospital, I も し く は generation, who か ら research in へ の agree to を ら れ た person よ に り, application records し た エ ン ト リ ー benchmark を against た す patients with よ り blood 検 body を take し て い る. Except the benchmark は (1) I も し く は generation, who か ら research in へ の agree to を ら れ な か っ た, (2) bedroom た き り の, (3) the kidney function handicap of (serum ク レ ア チ ニ ン ≧ 2.0 mg/dL), liver handicap (AST and ALT ≧ び 50 u/L) を recognize め る, (5) 悪 sex is swollen sores を have す る, more than 6 life が と presumption within 1 ヵ month で き る The と sets the て る る る. Blood 検 body は general blood (blood count, biochemical) は, メ タ ボ ロ ミ ク ス parsing, エ ク ソ ソ ー ム の parsing に for す る た め の も の と し て 処 し, - 80 ℃ に save し て い る. 検 body の take に あ た っ て は after hunger strike, 12 time above の toward に blood し, EDTA の っ た collects blood vessels を with い て, plasma を telecentric separation し, internal standard substance into り の - 40 ℃ メ タ ノ ー ル に え, mixing し, そ の, limit after filtration フ ィ ル タ ー へ move し, far し line, vacuum steaming the を っ た. The 検 body is stored at -80℃ at て て る る る. Plasma か ら の エ ク ソ ソ ー ム の spare に interstate し て は, qEV35 (メ イ ワ フ ォ ー シ ス) を with い た size exclusion chromatography に よ り line っ た. ま た, エ ク ソ ソ ー ム の a は フ レ イ ル の masato even す る viscera specific surface マ ー カ ー (god 経 で あ れ ば L1CAM, brawn で あ れ ば alpha sarcoglycan) に よ る separation に for す る た め に suspension に て - 80 ℃ で save し て い る. The subjects of the study were patients with <s:1> フレ, <s:1>, や, や, や, 厳, なセキュリティ, なセキュリティ, ポリシ, る, and <s:1>, て, る, る.