Metabolomics analysis of plasma and exosomes for frailty biomarkers

血浆和外泌体的衰弱生物标志物代谢组学分析

• 批准号: 22K07470
• 负责人: 横山 世理奈
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07470/
• 关键词: フレイル; バイオマーカー; メタボロミクス解析; エクソソーム

大阪大学医学部付属病院　老年・高血圧内科の65歳以上の男女で、入院中の患者に絞り、本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られた者より、申請書に記載したエントリー基準を満たす患者より血液検体を採取している。除外基準は①本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られなかった者、②寝たきりの者、③腎機能障害（血清クレアチニン≧2.0mg/dL）、肝障害（AST及びALT≧50U/L）を認める者、⑤悪性腫瘍を有する者、⑥余命が1ヵ月以内と推定できる者と設定している。血液検体は一般採血（血算、生化学）以外は、メタボロミクス解析、エクソソームの解析に供するためのものとして処理し、-80℃に保存している。検体の採取にあたっては、12時間以上絶食後の朝に採血し、EDTAの入った採血管を用いて、血漿を遠心分離し、内部標準物質入りの-40℃メタノールに加え、攪拌し、その後、限外濾過フィルターへ移し、遠心し、真空蒸着を行った。検体は-80℃保存している。血漿からのエクソソームの抽出に際しては、qEV35（メイワフォーシス）を用いたsize exclusion chromatographyにより行った。また、エクソソームの一部はフレイルの関連する臓器特異的表面マーカー（神経であればL1CAM、筋肉であればα-sarcoglycan）による分離に供するために懸濁液にて-80℃で保存している。研究対象患者のフレイル指標や臨床指標は厳重なセキュリティー・ポリシーの下、管理している。

Department of Geriatrics and Hypertension, Osaka University School of Medicine, Department of Geriatrics and Hypertension, Department of Medicine, Osaka University Except for criteria such as ① consent to participate in the study, ② consent to participate in the study, ③ renal impairment (serum creatinine ≥ 2.0 mg/dL), liver impairment (AST and ALT ≥ 50U/L), ④ sexual ulcer, and presumed life within 1 month. Blood samples are stored at-80℃ except for general blood collection (hematology and biochemistry). Sample collection, fasting for more than 12 hours, sample collection, EDTA injection, plasma remote separation, internal standard material injection at-40℃, addition, agitation, external filtration, remote filtration, vacuum evaporation Store at-80℃. The blood plasma is extracted from the sample by qEV35 ( A part of the solution is stored at-80℃ for separation from the organ-specific surface (L1CAM, α-sarcoglycan). The study focused on the patient's clinical indicators and the management of the disease.