エクソソームの輸送先選択性に基づきタウの伝播阻止を目指すアルツハイマー病治療

基于外泌体转运目的地选择性的阿尔茨海默病治疗旨在阻止 tau 增殖

• 批准号: 22K07503
• 负责人: 磯尾 紀子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07503/
• 关键词: アルツハイマー病; エクソソーム; タウ; 輸送機構; 脳内伝播

本研究は、アルツハイマー病における病原性タンパク質であるタウの脳内伝播を担うエクソソームを同定し、その輸送先を規定する特性を明らかにするとともに、その輸送経路を特異的に遮断する方法を開発することを目的としている。当該年度は、NanoSightを用いた粒子径測定や電顕像観察によりヒトP301S変異型タウを発現するNeuro2a細胞から精製・回収したタウ内包エクソソームがエクソソームとしての形態学的特徴を保持していることを確認した。さらに密度勾配遠心法を用いた分画による生化学的解析の結果、エクソソームに内包されるタウがAnnexin A2とよく局在が一致すること、タウが内包されることによりAnnexin A2がより密度の小さい画分へ集積することを見出した。このタウとAnnexin A2の局在パターンはエクソソームマーカータンパク質であるCD9/63/81の局在パターンとは一致せず、タウはAnnexin A2と共に古典的なエクソソームとは異なるエクソソームに内包されることが示唆された。また、タウ内包エクソソームをDiI等の脂溶性色素による膜の蛍光標識を行った上で神経細胞の培養上清中へ添加し、細胞へのuptake能をライブセルタイムラプスイメージングにより解析した。タウ内包エクソソームは経時的に細胞内へとuptakeされることが明らかになり、神経細胞から放出された後に神経細胞へとuptakeされる点で細胞間輸送への関与が示唆された。この膜を蛍光標識したタウ内包エクソソームを野生型マウスの海馬CA3領域に注入したところ、7日後にはCA1の神経細胞の投射先である海馬台の神経細胞内にエクソソームの蛍光と共にタウの局在が確認でき、CA3の神経細胞からCA1の神経細胞を介して海馬台へと細胞間輸送が生じたものと考えられた。

In this study, the pathogenic quality of Amantis disease is determined.あるタウの脳内伝 Bodan うエクソソームを同定し、その Transportation First of all, the characteristics of the transmission system, the specific blocking method, the purpose of the opening and the opening of the transmission path are specified. In that year, the NanoSight particle diameter measurement electromagnetic image sensor P301S was used to measure the particle size, and the special type of the particle diameter was measured. 2a cell purification and recycling The characteristics of ソームとしてのmorphology are maintained and confirmed. Analytical results of the biochemistry of the density matching telecentric method using the いた division and the エクソソームに内包 Annexin A2とよく in the same すること、タウが内包されることによりAnnexin A2がよりdensityの小さいdraw分へassembleすることを见出した.このタウとAnnexin A2's round in the パターンはエクソソームマーカータンパクquality であるCD 9/63/81The game is in パターンとは unanimous せず、タウはAnnexin A2と公にClassic なエクソソームとはdifferent なるエクソソームに内包されることが Show唆された.また, タウ contains エクソソームをDiI and other fat-soluble pigments, による film, の蛍を行った上で神経 cells and culture Add it to the culture supernatant, and the cells can be analyzed by adding it to the culture supernatant.タウ内包エクソソームは経时に内UPtakeされることが明らかになり、神経 fine The cell is released and the cell is released. The cell is uptaken and transported between cells.この片を蛍光LOGOしたタウ内包エクソソームをWild type マウスの海马CA3 fieldにInjection of したところ, 7 days later, the projection of にはCA1 の神経 cells first である海马台の神経 fine Intracellular light source and CA3 cells are confirmedらCA1's の神経手机 综合   海马台   生 じ た も の と 考 え ら れ た.