Investigation of virus RNA analysis using FFPE specimens to clarify the pathogenesis of acute rupture of chodae tendineae of the mitral valve in infants

FFPE标本病毒RNA分析阐明婴儿二尖瓣腱腱膜急性破裂的发病机制

• 批准号: 22K07883
• 负责人: 黒嵜 健一
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07883/
• 关键词: 乳児特発性僧帽弁腱索断裂; 腱索断裂; 急性心不全; 抗SSA抗体; 川崎病; 心内膜炎; ウイルス

乳児特発性僧帽弁腱索断裂における僧帽弁および腱索の心内膜には、単核球を中心とした炎症細胞浸潤が認められ(Shiraishi et al., Circulation 2014;130:1053)、病因としてウイルス感染、川崎病、母親由来の抗SSA抗体などが示唆されている。本疾患は発症が年間10数例と希少で、また搬送直後に手術に向かうために、病因解明のための新鮮サンプルの収集が困難である。そこで我々は、過去の病理組織標本から最新の遺伝子工学的手法を駆使して、本疾患の病態と病因解明を試みた。[対象と方法]僧帽弁置換した腱索断裂乳児４例(断裂群：生後3-6ヶ月(中央値4ヶ月)、川崎病およびSSA抗体陽性例を除く)と弁置換した先天性心疾患２例(対照群：生後11および13ヶ月)のパラフィン包埋された僧帽弁および腱索標本の切片を高感度ISH法にて解析した。[結果]前回の研究で行った病原微生物の検索を目的としたメタトランスクリプトーム解析では、断裂群４例中２例に小児に一般的な感染症を引き起こすDNA virus Xに高い相補性が検出された。そこで今回は、高感度ISH法(RNAscope)を行ったとところ、断裂群の組織片に心内膜を主体とするDNAvirus X（未発表にてXとする）のRNAシグナルが確認された。[考察]本疾患では僧帽弁および腱索に何らかの炎症と免疫応答が存在すること、引き金として、一般的に小児に発疹と感冒症状をきたすDNAvirus Xが関与することが示唆された。今後は患者の入院時の血液や咽頭拭い液などの新鮮なサンプルを解析し、virus Xの関与を検証する予定である。

Urinary tract idiopathic mitral cord rupture, mitral cord rupture, endocardial rupture, and inflammatory cell infiltration (Shiraishi et al., Circulation 2014;130:1053), cause of infection, Kawasaki disease, anti-SSA antibody from mother, disease. There have been 10 or so cases of this disease in the past year, and it has been difficult to carry out direct surgery, and the cause of the disease has been clarified, so it is difficult to collect fresh food. The pathological tissue specimens of the past and the latest techniques of engineering are used to make the pathological changes of this disease. [Material method] mitral replacement, 4 cases of chordee rupture and breast area (rupture group: 3-6 months after birth (center 4 months), Kawasaki disease, SSA antibody positive cases, removal) and mitral replacement 2 cases of congenital heart disease (study group: 11 months to 13 months after birth), embedding and embedding of cord tendine specimens, sectioning and analysis by high-sensitivity ISH method. [Result] Previous research on pathogenic microorganisms has been carried out for the purpose of researchトームanalysisでは, 2 out of 4 cases of rupture cluster and 2 cases of common infectious diseases caused by こすDNA Virus X is highly complementary and has a complementary nature.そこでhimaiは, high-sensitivity ISH method (RNAscope) を行ったとところ, fragmentation group のtissue piece にendocardial をmain body とするDNAvirus X（无発表にてXとする）のRNAシグナルがConfirmationされた. [Investigation] This disease is caused by the presence of inflammation, immune response, common rash, common cold symptoms, DNAvirus XがGUan and することがshows instigation された. From now on, it will be determined whether the patient's blood and throat swabs will be analyzed freshly when they are admitted to the hospital, and whether the virus X will be confirmed or not.