小児腸管内の病原・薬剤耐性遺伝子水平伝播におけるAtypical EAECの役割

非典型 EAEC 在小儿肠道致病基因和耐药基因水平传播中的作用

• 批准号: 22K07919
• 负责人: 藺牟田 直子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07919/
• 关键词: EAEC; atypical EAEC; aggR; biofilm; HEp-2 assay; ESBL; CTX-M

2022年度は、2011～19年の小児下痢症患者の便由来大腸菌3291株から143株のatypical EAEC (aEAEC)を決定し、病原遺伝子、基質特異性拡張型β-ラクタマーゼCTX-M遺伝子の検出、CTX-M型別を行った。まず3291株からaggR遺伝子保有EAEC（typical EAEC, tEAEC）81株とその他の下痢原性大腸菌の病原遺伝子を保有する株を除いた3099株を対象に、バイオフィルムアッセイでバイオフィルム形成能（BI）の高い株（＞OD0.2 ）193株を抽出し、HEp-2細胞付着試験でaEAEC 143株を決定した。aEAEC143株中19株（13.3％）が典型的な凝集付着（tAA）を示し、124株（86.7％）は非典型的な凝集付着（aAA）を示した。BIはtAA 0.75、aAA 0.4とtAAの方が高い値を示した。CTX-M遺伝子は9株（6.3％）が保有し、そのうち6株（66.7％）はaAAで、CTX-M型は14が3株、15が3株、27が2株、97が１株であった。K1莢膜遺伝子は33株（23.1％）が保有し、そのうち32株（97％）がaAAであった。PhylogroupはB2が69株（48.3％）と最も多く、68株（98.6％）がaAAであった。tEAECのプラスミドと染色体上の病原遺伝子保有株が49株（34.3％）、phylogroup A・B1・B2に属する多くの株がその両方の病原遺伝子を同時に保有していた。尿路病原性大腸菌の病原遺伝子はphylogroup EとUT(untypable)以外の株で検出された。CTX-M/K1遺伝子保有株がCTX-M型14と15の2株検出されたが、14の株はphylogroup B1に属しEAECの染色体とプラスミドの両方の病原遺伝子を保有し、付着はtAAを示した。tEAEC 81株についてもHEp-2細胞付着試験を行い、tAA 28株（34.6％）、aAA 24株（29.6％）がみられたが、29株（35.8％）はBIが0.2以下で凝集付着を示さない株であった。

在2022财年中，从2011年至2019年之间的儿科腹泻患者的3291株粪便衍生的大肠杆菌菌株确定了143个非典型EAEC（AEAEC），并确定了检测到β-内酰胺酶CTX-M基因的致病基因和底物特异性。首先，从3,291个菌株中提取了193个具有高生物膜形成（BI）（> od0.2）的菌株，不包括81 EAEC（典型的EAC，TEAEC），携带AGGR基因和其他菌株，以及携带腹泻性E. coli的致病基因，使用Biofilm Assay和193 strains and and Bioflm stranains and Bioflm strains and Bioflm strains and Bioflm strains and Bioflm affilm of。通过HEP-2细胞附着试验确定AEAEC菌株。在AEAEC143菌株中，有19个（13.3％）显示出典型的聚集粘附（TAA），而124（86.7％）显示出非典型的聚集粘附（AAA）。在0.75时TAA的BI较高，而AAA为0.4。 CTX-M基因由9种菌株（6.3％）持有，其中6个（66.7％）为AAA，CTX-M型为14、3菌株，15、27和1菌株。 K1胶囊基因由33个菌株（23.1％）持有，其中32个（97％）为AAA。 PhylogGroup在69个菌株（48.3％）时的B2最高，其中68个菌株（98.6％）为AAA。 49个菌株（34.3％）的TEAEC质粒和染色体病原体基因携带这两种菌株（34.3％），而属于门group A，B1和B2的许多菌株同时携带两个病原体基因。除门类E和UT以外的其他菌株中，检测到肝病大肠杆菌的致病基因（不可用）。检测到携带CTX-M/K1基因的两种菌株，即14型和15型CTX-M型，但14个菌株属于Phylogloup B1，并携带EAEC染色体和质粒的致病基因，并且附着显示TAA。还针对TEAEC 81菌株进行了HEP-2细胞附着试验，发现28个TAA菌株（34.6％）和24个AAA菌株（29.6％），但29个菌株（35.8％）是BI低于0.2的菌株，没有0.2菌株，没有聚集粘附。

项目成果

小児下痢症患児由来大腸菌における下痢原性大腸菌の頻度と推移（2011～2019年）

小儿腹泻患儿大肠杆菌中致泻性大肠杆菌频率及趋势（2011-2019年）

• 发表时间: 2022
• 作者: 藺牟田直子;児玉祐一;中村隼人;大岡唯祐;西 順一郎
• 通讯作者: 西 順一郎

小児下痢症患児由来大腸菌における下痢原性大腸菌の頻度とESBL 産生菌の検討（2011～2019年）

小儿腹泻患儿致泻性大肠杆菌及产ESBL菌频率检测（2011-2019年）

• 发表时间: 2022
• 作者: 藺牟田直子;児玉祐一;西 順一郎
• 通讯作者: 西 順一郎